丛 微,喻海茫,于晶晶,李迪强,张于光,*

1 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所,国家林业和草原局生物多样性保护重点实验室, 北京 100091

2 湖南省长沙县职业中专学校, 长沙 410142

土壤中存在着最丰富多样的微生物,其不同的生理特性与功能直接影响生态环境,驱动生物地球化学物质循环[1-4]。土壤微生物是地上植物群落和土壤养分循环联系的关键纽带[5-7],同时,土壤微生物在构建植物群落、维持植物多样性和植物健康等方面也发挥着重要作用[8-9]。然而,土壤微生物多样性的降低和群落结构的变化会影响多种生态系统功能,如植物多样性、有机质降解和养分的循环与利用[10]。研究发现,土地利用变化将引起土壤微生物群落结构的变化[11],从而导致微生物功能基因丰度和生态功能的变化[12]。

1 研究方法

1.1 土壤样品采集

土壤样品采集于黑龙江省双宝山林场,选取林地(RS0)、林地开垦后种植人参3a(RS3)、种植人参4a(RS4)和已收获人参(种植4a)的空地(AS4)。每种用地类型设置3个重复样地,样地面积为10 m×10 m,样地间隔超过20 m。采用多点采样法采集0—10 cm土壤,每种用地类型采集3份土壤样品。土壤样品分成两部分放入标记好的自封袋中,一部分常温保存,用于土壤理化性质分析；一部分冷冻(-20℃)保存,用于土壤DNA测定分析。

1.2 土壤理化性质测定

土壤理化性质测定采用常规方法[20],包括土壤含水量、pH值、有机碳、全氮、全磷、全钾、水解性氮、有效磷、速效钾、铵态氮、硝态氮的测定。

1.3 土壤细菌DNA提取及测序

使用PowerSoil试剂盒(QIAGEN,德国)提取土壤样品微生物DNA,通过1%琼脂糖凝胶电泳检测DNA完整性,并用NanoDrop2000检测DNA溶液的浓度和纯度。……