单长林，周 圆，李孝军

（舟山海关综合技术服务中心，浙江 舟山 316021）

【研究意义】玉米细菌性枯萎病菌（Pantoea stewartiisubsp.stewarii，Pss）是我国进境植物检疫性病原物之一，主要分布在美国、加拿大、墨西哥、巴西、秘鲁、意大利、波兰、罗马尼亚、马来西亚、泰国、越南以及俄罗斯、乌克兰等原苏联国家和地区［1］。尽管我国是仅次于美国的第二大玉米生产国，但随着国内玉米需求量的激增，未来中国仍需要通过进口来填补玉米产需缺口，玉米净进口将成为常态［2］。目前玉米进口来源主要集中在乌克兰、美国等玉米细菌性枯萎病菌发生国家［3］。随着玉米进口贸易的发展，玉米细菌性枯萎病菌侵入我国风险剧增，该病原物在我国主要玉米产区均适合定殖，具有广泛的适生区域，一旦入侵将严重威胁我国玉米生产安全［4］。因此，建立并掌握针对玉米细菌性枯萎病菌快速检测技术至关重要。

【前人研究进展】目前，针对玉米细菌性枯萎病菌的检测主要有传统的分离培养［5］、血清学检测［6］、分子生物学检测［7-8］和红外光谱检测［9］，这些方法或操作复杂、耗时较长，或需大型仪器的支持，无法实现体外恒温条件的快速检测。与传统PCR的变性-退火-延伸等热循环解链原理不同，环介导基因恒温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）和重组酶介导等温扩增技术（recombinase-aided amplification,RAA）均可在恒温条件下实现目标序列的扩增。LAMP技术［10］在65℃条件下，使用链置换型BstDNA聚合酶，利用4～6个引物，通过类似于滚环复制的链替换反应产生互补序列，形成大小不一的一系列条带。LAMP技术是目前体外恒温扩增检测病原物主要方法之一，广泛用于细菌、真菌、病毒等病原物检测［11-15］。……