金铭，刘莉萍，李遇梅

(江苏大学附属医院皮肤科，江苏 镇江 212001)

角质形成细胞又称角蛋白形成细胞，来源于外胚层，是表皮的主要细胞类型，约占表皮的95%。根据角质形成细胞不同分化阶段的细胞特点，将表皮分为5层：基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层，其中基底层是未分化的细胞，具有分裂增殖能力[1]。角质细胞构成完整的皮肤屏障以抵御外界各种物理、化学物质和病原微生物的损伤，当这层屏障由于外伤、感染、免疫反应等原因功能受损时，将会导致一系列皮肤疾病的发生，比较典型的有银屑病、天疱疮、大疱性表皮松懈症。因此目前有很多与之相关的研究，例如上皮生物学、角质细胞分化以及角质细胞刺激先天免疫反应[2]等等。近年来，为了更好地修复皮肤慢性损伤、烧烫伤，人工皮肤的研究进行得如火如荼，而角质细胞在人工皮肤的构建方面是必不可少的[3-4]。

小鼠是当前用于研究人类疾病最重要的模式生物，通过基因编辑技术，小鼠角质细胞已被广泛用于研究表皮屏障、瘢痕形成、银屑病等生理病理机制以及关键分子的调控[5-8]。其中，角质形成细胞的维持培养为此类研究提供了不可或缺的体外模型。小鼠角质细胞的培养起始于20世纪70年代，半个世纪以来，培养技术和方式在不断改进和细化。然而，小鼠角质细胞在体外传代过程中很容易发生分化和衰老，而且存在贴壁困难、成纤维细胞污染等问题。本文回顾了近年来国内外有关小鼠角质细胞分离培养的文献，总结影响其体外增殖、分化的各个因素，以期建立更加优化的培养体系。……