王怡，许晋升，孙秋悦，曹宸，丁先超，严志新

(1. 江苏大学医学院， 江苏 镇江 212013； 2. 江苏大学附属医院烧伤整形外科， 江苏 镇江 212001)

淋巴管再生常见于炎性反应[1]、创伤修复[2]、组织器官移植[3]、肿瘤转移[4]和肢体慢性淋巴水肿[5]等病变及病理过程。近年来，相继发现淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1(lymphatic vessel endothelial hyaluronan receptor-1，LYVE-1)、血管内皮细胞生长因子受体-3(vascular endothelial cell growth factor receptor-3，VEGFR-3)、prospero相关同源盒转录因子1 (prospero-related homeobox transcription factor 1，Prox1)和平足蛋白(podoplanin)等淋巴管特异性标志物，致胚胎淋巴管的生长和发育的研究有了快速进展[6]，但对于炎性淋巴管生长的研究仍缺乏理想的动物模型。正常角膜无血管和淋巴管生长，在各种因素刺激下，如感染、烧伤、手术或角膜移植术后等，新生血管可以从角膜缘长入角膜[7]，同时伴有炎性淋巴管生长[8]。因此，本研究通过缝合小鼠角膜进行炎性淋巴管模型的探究。

1 材料与方法

1.1 实验动物、主要试剂及仪器

BALB/c小鼠60只，雌性，6～8 周龄，体质量20～25 g，购自江苏大学实验动物中心[许可证号：SYXK(苏)202003784]，饲养于室温18～24 ℃，每日光照12 h，自由摄食饮水。实验动物处置获得江苏大学伦理委员会审查批准。

牛血清白蛋白(美国Sigma公司)；Alexa Fluor®大鼠抗小鼠CD31抗体(美国BioLegend公司)；兔抗小鼠LYVE-1抗体(英国Abcam公司)；Alexa Fluor®555 驴抗兔抗体(美国Invitrogen公司)；逆转录PCR试剂盒、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)试剂盒均为美国ABI公司产品；显微外科手术器械(上海手术器械厂)；裂隙灯显微镜(苏州康捷医疗器械有限公司)；手术显微镜(镇江中天光学仪器有限责任公司)；解剖显微镜(美国Motic公司)；石蜡切片机(德国Slee Mainz公司)；DU-800紫外分光光度计(美国Beckman coulter公司)；Zeiss LSM 710激光共聚焦扫描显微镜、Zeiss 2010 Light Edition数码摄像系统均为德国Carl Zeiss公司产品。……