冀晓丽，胡 玥，盛云华，唐黎明

(上海市食品药品检验所 药理毒理室/药物安全评价中心，国家药品监督管理局化学药品制剂质量分析重点实验室，上海 201203)

呼吸道体外模型常被用于研究外源性化合物、吸入制剂、空气污染物、纳米颗粒物、烟草制品等暴露诱导的吸入毒性和肺部疾病[1]。目前，体外吸入毒性评价多采用稳定传代的细胞系，如A549、Calu3、16HBE、BEAS-2B等构建呼吸道上皮的模型，然而这些细胞系的生理特征与体细胞之间差异较大，对呼吸系统的特征反应具有一定局限性[2]。呼吸道上皮细胞是机体呼吸道防御系统的重要屏障，它形成的假复层纤毛柱状上皮将人体的内环境与外界环境有效隔离[3]，呼吸道气管和支气管组织表面分布的细胞包括纤毛细胞、分泌黏液的杯状细胞、无纤毛细胞和基底细胞等[3]。因此，唯有原代培养呼吸道上皮细胞才能在生理功能和结构上更贴近体内气管上皮细胞的自然生长状态，成为研究气管上皮功能和相关疾病的重要体外模型[4]。

气液体界面(air-liquid interface，ALI)培养技术是培养呼吸道上皮细胞的重要方法，ALI培养的研究在国外已有多年的历史[5]，但目前国内也只有少数实验室成功建立了该培养平台，而且不同实验室采用的方法各异[6]。其中包括原代细胞的分离方法、ALI培养基成份、预铺胶原类型的选择、细胞的接种密度等都各不相同[7-8]。本研究建立的小鼠气管上皮细胞(mouse tracheal epithelial cells，MTEC)分离和分化培养模型，是从小鼠体内分离气管后，通过ALI培养上皮细胞逐步分化出纤毛，为研究纤毛的形成和气道上皮发育的最佳模型[9]。……