王一菲，刘新星，张青，郑育声，李东栋

海南大学热带作物学院,海口 570228

油棕(ElaeisguineensisJacq.)是棕榈科单子叶热带植物，它主要生产2种棕榈油和棕榈仁油，占世界油量的36%[1]。其中，棕榈油含有棕榈酸、油酸、维生素E和类胡萝卜素，具有极高的营养价值[2]。应用基因工程手段鉴定油棕中与油脂代谢相关基因的功能，进而对其脂肪酸种类和含量进行遗传修饰，对提高棕榈油的产量及改善其品质具有重要的价值。

然而，作为多年生木本植物，油棕植株再生体系周期很长，转基因植株也不易获得。因此，研究者通常将油棕基因异源表达于模式植物如拟南芥中，以研究其功能。但由于遗传背景差别太大而无法取得满意的效果。原生质体瞬时转化系统快速、高效，被广泛用于亚细胞定位、蛋白与蛋白之间的互作、蛋白与启动子之间的特异性结合等研究[3]。利用油棕原生质体进行基因的同源表达，将有效避免异源表达可能造成的差异结果。

目前，油棕原生质体的分离[4-6]及瞬时转化[7]虽然有过报道，但其原材料都是油棕胚性悬浮细胞。然而由胚性愈伤到胚性悬浮细胞要3个月[4]，耗时长。因此，本研究以油棕试管苗叶片为原材料，分离得到原生质体，并借助绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白，对油棕叶肉原生质体的双质粒瞬时共转化体系进行优化，旨在为油棕基因的同源表达、功能鉴定及蛋白质与DNA、蛋白质与蛋白质之间的互作研究提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材 料

油棕(ElaeisguineensisJacq.)试管苗幼嫩叶片(发芽后25 d)，以海南大学热带棕榈植物实验室诱导获得的油棕愈伤组织为基础，通过芽诱导获得幼嫩植株。……