卫红萍 任衍钢

（阳泉师范高等专科学校 山西阳泉 045200）

显微成像技术的发展是生命科学的重要驱动力之一，其中，荧光显微技术扮演着及其重要的角色[1]。依据2009 年《自然细胞生物学》（Nature Cell Biology）刊出《光学显微镜发展里程碑》的21项突破性进展中，至少有一半与荧光显微技术密切相关。

1 荧光显微技术的发明

荧光现象最早的描述被认为是16 世纪西班牙植物学家莫纳德斯（Monardes）对软质木质提取物荧光特性的报道。19 世纪早期研究发现，许多标本在紫外线照射下会发出荧光。1852 年，英国科学家斯托克斯（Stokes）在其出版的书中首创了“荧光”（fluorescence）一词。1882 年，德国科学家埃尔利希（Ehrlich，1908 年诺贝尔生理学或医学奖获得者）首先用荧光染料——荧光素钠确定眼睛中体液分泌的途径，开启了动物生理学使用荧光染料的先河。

早在19 世纪荧光方法就被应用，荧光显微技术的发明则在20 世纪后。德国物理学家科勒（Köhler）受阿贝（Abbe）发现波长越短分辨率越高的启发，于1904 年在德国耶拿的蔡司光学工厂制造了第1 台紫外（UV）显微镜。科勒注意到，在紫外线照射下某些物体会发出较长波长的光——荧光。依据这种现象，德国物理学家海姆施塔特（Heimstädt）于1911 年建造了第1 台荧光显微镜[2]。但是，因最初对成像物体自身荧光的依赖，以及对透射光和暗场聚光镜的需要限制了该显微镜的使用。

20 年后，奥地利的研究员海廷格（Haitinger）和其他科学家一起开发了二次荧光显微技术。与第1 次荧光显微技术不同的是，这次可将外源荧光化学物质应用于样品，并创造了“荧光色素”术语。……