侯林丛，黄好强，徐志海，王彩杰，向霞霞，张 星

（1.河南海瑞正检测技术有限公司，河南 郑州 450001；2.郑州赛科药业科技有限公司；3.河南牧经养殖技术研究院有限公司；4.河南牧业经济学院）

目前，饲料酸化剂中有机酸的测定方法有酸碱滴定法、离子色谱法、气相色谱法、气质联用法、液相色谱法等。高效液相色谱法具有分析范围广、检测速度快等优点，利用高效液相色谱测定有机酸大多是关于青贮发酵液、食品及饮料等，而利用高效液相色谱同时测定饲料添加剂中苹果酸、甲酸、乙酸、丙酸、丁酸含量的报道较少，该方法在大量的实验基础上，建立了一种同时测定5种有机酸的高效液相色谱法，以期为基层饲料检验人员提供新的检测参考。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

分析天平（赛多利斯科学仪器（北京）有限公司）；高效液相色谱仪（美国waters公司）：配紫外检测器；超声波处理器（昆山超声仪器）；离心机（安徽嘉文仪器装备有限公司）。

苹果酸、甲酸、乙酸标准品：含量≥99.0%（北京坛墨质检科技有限公司；丙酸、丁酸标准品：含量≥99.0%（北京曼哈格生物科技有限公司）；磷酸（色谱纯）；乙腈（色谱纯）；实验用水为超纯水。

1.2 标准溶液的配制

精密称取苹果酸、甲酸、乙酸、丙酸、丁酸标准品100 mg于10 mL 容量瓶中，加少量超纯水溶解，用超纯水定容至刻度，摇匀，分别得出浓度为10.0 mg/mL 各有机酸标准贮备液，根据样品含量适当稀释成一系列混合标准工作液。

1.3 样品前处理

称取适量样品（根据样品中各有机酸含量称取0.2～2 g）于100 mL容量瓶中，加入70 mL超纯水，于超声波中提取20 min，期间不断摇晃促使溶解，用超纯水定容至刻度，1 000 r/min 离心10 min，取上清液经0.45 靘滤膜过滤，上机测定。……