李心雨 ，罗春霞，敬爽，李新霞

1. 新疆医科大学药学院（乌鲁木齐 830011）；2. 石河子大学药学院（石河子 832000）；3. 新疆师范大学化学化工学院（乌鲁木齐 830054）

大蒜（Allium sativumL.）为百合科葱属植物蒜的鳞茎，是一种具有悠久历史的药食两用植物[1]。蒜氨酸裂解酶（Alliinase，EC4.4.1.4）简称蒜酶，是用来催化大蒜中活性成分蒜氨酸，使其裂解生成大蒜辣素[2-4]。大蒜辣素是公认的大蒜活性成分，具有多种药理活性作用[5-9]。蒜氨酸酶相对分子质量为103 kDa[10]，大蒜粉末中蒜酶有两个相同的亚基结构，相对分子质量为51.5 kDa[11]。一般常采用还原型SDSPAGE凝胶电泳法测定蒜酶相对分子质量及蒜酶在大蒜总蛋白中的含量[12]，但是由于蒜酶结构为双亚基结构[13]，在电泳测定前加入的载样缓冲液首先使蒜酶中二硫键断裂而最终检测为蒜酶亚基，不能真实反映大蒜中的蒜酶分布情况。为了进一步确定蒜酶含量和分布，建立蒜酶的HPLC检测方法，被测蛋白与其他干扰物质之间有很好的分离度[13-14]，试验采用高效分子排阻色谱（SEC-HPLC）法检测蒜酶，根据凝胶色谱柱的分子筛原理，对蒜酶提取物中的蒜酶二聚体和亚基结构进行检测，进一步研究大蒜及大蒜蒜酶提取物中的蒜酶分布和结构特征。

1 仪器与试药

1.1 仪器与设备

LC-20AD-SPD-RID高效液相色谱仪（日本岛津）；Exceed-E艾柯超纯水机（成都唐氏康宁科技发展有限公司）；M1-L213B微波炉（Midea集团）；JYL-C020E匀浆机（九阳股份有限公司）。

1.2 试剂与材料

磷酸氢二钠（成都市科龙化工试剂厂，批号2013100801）；磷酸二氢钾（天津市福晨化学试剂厂，批号20131007）；牛血清蛋白（上海源叶生物科技有限公司，批号L16M6S2，纯度≥98%）；……