柴发永

（山东省食品药品审评认证中心，山东 济南 250014）

大豆异黄酮是大豆中一种类雌激素结构的天然活性成分，具有多方面的保健功效。研究显示，大豆异黄酮具有预防骨质疏松、抑制肿瘤及抗衰老等生物学作用[1]。本文主要研究其促进免疫力的功效作用。

1 材料与方法

1.1 受试物

大豆异黄酮胶囊，0.3 g/粒（每粒含大豆异黄酮50mg），每日1粒。

1.2 实验动物

SPF级昆明种雌性小鼠[选用北京华阜康生物科技股份有限公司，许可证号：SCXK（京）2014-0004]，平均体重20g，每组10只。

1.3 剂量及给药：

实验设计人体推荐剂量的5倍，10倍，30倍，设置为低、中、高剂量组，即每日25 mg/kg、50 mg/kg和150 mgkg（即大豆异黄酮4.16 mg、8.33和25.14 mg/kg）。用5%羧甲基纤维素钠溶液配制成相应浓度的受试物溶液，每日经口给予一次，灌胃体积为10 ml/kg。同时设置模型组和对照组，用5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃，灌胃体积与受试物组相同，连续31 d。各组均给与维持饲料。除空白对照组，其余各组小鼠于灌胃第25、27、29 d腹腔注射环磷酰胺制造免疫力低下模型[2]。

1.4 实验方法：

1.4.1 脏器指数的测定

实验结束后，小鼠称重，脱臼处死，取脾脏和胸腺称重，计算脏器指数。脾脏指数=脾脏/体重；胸腺指数=胸腺/体重。

1.4.2 迟发型变态反应实验

取羊血，生理盐水洗涤三次，每只鼠腹腔注射2%绵阳红细胞溶液（V/V）0.2ml，致敏后4 d，测量左后足趾部厚度。

1.4.3 碳粒廓清能力的测定

小鼠称重后，根据体重尾静脉注射印度墨汁（稀释至浓度为0.05 mL/10gBW）。墨汁注入后，立即计时。从注射墨汁2 min、10 min两个时间点分别眼眶静脉取血20 μL，然后加到3.0 mL 0.1%碳酸钠溶液中。在600 nm波长处测定光密度值（OD），以0.1%碳酸钠溶液作为空白对照。……