费昭雪， 刘莉丽， 侯 娜， 彭少兵

(1.西北农林科技大学林学院， 杨凌 712100； 2.贵州省林业科学研究院， 贵阳 550005)

油松(PinustabulaeformisCarriere.)为松科松属常绿乔木，树高可达30 m以上，胸径可达1 m[1]。油松适应性强，广泛分布于我国东北、西北、华中、西南等地区[2-4]。油松材质致密耐用，是建筑、造船及家具等的良好用材[5-8]。油松的用途广泛，市场需求量逐年增加，野生资源已经难以满足需求，主要依靠人工种植，因此，油松苗木供应亟待一种快速繁殖的方法。植物组织培养技术具有高效快速、遗传稳定的优点成为了油松繁殖的有效途径[9-11]。试验以油松组织培养关键技术为核心进行研究，旨在为相关的生产研究提供一定的依据。

1 实验材料与方法

1.1 实验材料

于2018年春季采集一年生健壮、无病虫害的油松嫩枝作为外植体，在洗洁精水中漂洗3～5 min，洗去材料表面的泥土和灰尘，然后用自来水进行流动冲洗，时间30 min[12]。清洗中修剪过长或过大枝条，随后用75%酒精消毒30 s，0.1%升汞消毒10 min，最后用无菌水冲洗3～5次。

1.2 实验方法

1.2.1外植体预处理1.2.2油松外植体的芽分化培养

研究油松的分化，可以为遗传体系建立和多倍体等实验做铺垫，另外，快速繁殖还能够缩短育种周期，提高药用成分的含量。实验以MS为基本培养基，加入30.0 g·L-1蔗糖，5.0 g·L-1琼脂，采用正交实验法设计6-BA、TDZ和NAA 三种激素的不同浓度和配比，添加到培养基中[13-16]。分裂素(6-BA)设置浓度分别为1.0、2.0、3.0 mg·L-1，TDZ设置浓度分别为0.01、0.05、0.10 mg·L-1，生长素(NAA)设置浓度分别为0.05、0.1、0.2 mg·L-1。按照正交试验设计9组不同激素浓度配比和1组空白对照处理。实验所用材料为健壮无菌苗，茎段(不带叶腋)切成长约1 cm，平铺于培养基中，每瓶4枚，每组10瓶，重复3次。……