布鲁氏菌病实验室诊断方法的研究进展

2021-01-10马梅霞甘肃省临夏州康乐县农业农村局动物疫病预防控制中心731500

兽医导刊 2021年15期

马梅霞/甘肃省临夏州康乐县农业农村局动物疫病预防控制中心 731500

布鲁氏菌病是当前比较严重的人畜共患病之一，每年呈现发病上升的趋势。为此，应该建立快速有效和操作方法简单的实验室诊断方法，为疾病的防控工作奠定基础。本文主要阐述了布鲁氏菌病检测的主要方法，希望为相关的工作人员提供参考。

1 布鲁氏菌病的危害

首先，布鲁氏菌病可以传染动物和人类，具有很强的传染性。发病动物是主要的传染源，同时被污染的粪便和排泄物也会带有大量的病菌，造成该病的传播。其次，布鲁氏菌的种类有多种，其中羊种布病感染比较严重，一旦患病，母畜发生流产，公畜出现睾丸炎，影响繁殖能力。最后，人感染布鲁氏菌病主要是因为接触患病的动物，或者接触动物制品。患病之后会出现明显的发热、多汗和关节疼痛的症状。现阶段，该疾病在全世界范围内都有流行，对畜牧养殖业的危害比较大，给养殖户造成严重的经济损失，为此，应该不断提高布鲁氏菌病的实验室诊断水平，为后来的防治工作奠定基础。

2 布鲁氏菌病的诊断技术

2.1 病原学诊断病原学检测是诊断布鲁氏菌病的主要技术，需要对病料进行采集、保存、分离、培养和鉴定等。为此，需要在无菌条件下采集流产的胎儿或者胎盘等物质，然后经过琼脂培养，待菌落长成之后再对菌落的形态、生化反应和染色特点进行判断。之后结合布鲁氏菌的菌落的特征可以将其作具体的分类，其中光滑型菌落占绝大多数。经过显微镜可以观察红色球状小杆菌，呈现短链或串状排列的形式。此外，最为直接的方法就是从血液和体液中能够检测到布鲁氏菌。需要注意的是，病原学诊断对实验室人员和环境的要求比较高，不适合临床快速诊断。

2.2 免疫学诊断免疫学诊断方法包括血清学诊断，是比较常见的诊断方法，主要包括酶联免疫吸附实验、补体结合试验、胶体金标试验等。

2.2.1 补体结合试验该种实验方法就是观察动物的红细胞是否发生溶血，然后判断血清中有无带待检抗体，该方法的主要特点是灵敏性高和特异性强。对牛、羊等布病的临床诊断具有明显的效果和价值，但是该种方法不适用猪布病的诊断。需要注意的是，该种方法的敏感性比较高，但是操作困难和繁琐，可能存在一定的主观性。

2.2.2 胶体金标试验首先，胶体金标试验是新型的免疫标记技术，相关的学者研究表明，该种试验方法的主要特点是操作简单和反应速度快，对布病的筛查和现场快速诊断具有重要的作用。其次，有的学者还对该种试验方法在不同地区的应用情况进行了比较，结果发现，该种试验方法能够快速的发现患者，同时能够有效的监测疫情，具有很好的推广应用效果，对巩固布鲁氏菌病的防治成果具有重要的意义。此外，该种试验方法具有高度敏感和特异性的特点，能够快速检测疫病，也可以在基层畜牧养殖业中推广使用。需要注意的是，该种方法不能实现定量的测定，同时灵敏度还需要进一步的提升，但是市场发展空间良好。

2.2.3 酶联免疫吸附试验首先，该种试验方法在上个世纪70 年代比较流行，具有灵敏性高和特异性强的特点，同时操作简单，能够确定诊断，并且也可以作为筛选和鉴别诊断的方法。在具体的布病检测的过程中，能够实现对血清抗体的检测。其次，当前的布病检测的酶联免疫吸附试验主要包括两种，都能取得比较好的诊断效果。但是需要注意的是，虽然该种试验方法具有灵敏度高和特异性的特点，但是不能区分免疫接种产生的抗体是自然感染产生的抗体。

2.3 分子生物学诊断分子生物学诊断技术是比较新型的技术，包括聚合酶链式反应、核酸探针检测等。

2.3.1 聚合酶链式反应首先，该技术的主要特点是快速、准确、灵敏和高效，是当前比较常见的布鲁氏菌病诊断方法。其次，荧光定量聚合酶酶链式反应是在该技术的基础上发展起来的新技术，最大的特点是能够实时的捕捉荧光信号，直接显示在电脑上，该种方法是现阶段比较灵敏和准确的检测样品中的核酸含量的检测方法，提高了检测的准确率。但是该种方法成本比较高，不适合在基层养殖业中推广。

2.3.2 核酸探针检测核酸探针检测是现阶段分子生物学中应用比较广泛的基础。该技术的主要特点是灵敏度高和特异性，同时操作简单，应用于临床样本检测和流行病学调查中都具有重要的意义，尤其在血清学阳性和慢性病人血清的检测中发挥着重要的作用。

2.3.3 环介导等温扩增技术该技术的特异性比较强，具有很好的扩张效果。此外，该技术的灵敏度和特异性都比较好，具有检测速度快、简单和经济等特点，不需要采取专用的仪器设备，在基层畜牧业发展中可以用于布鲁氏菌的快速检测，是当前快速检测布鲁氏菌的有效手段。随着分子生物学技术的不断发展，该技术的优势越来越明显，对设备的要求不高，操作简单，减少了检测过程中的费用。

3 布鲁氏菌病的防治

3.1 定期的免疫接种通过免疫接种能够预防布鲁氏菌病，结合养殖地所在的实际情况选择疫苗接种。为了加强免疫的效果，在接种完成的两年内可以进行再一次接种。如果检测出阳性群，需要用3 年的时间接种，可以在第4 年停止接种，然后进行疫情的观测。

3.2 提高防疫工作的认识程度布鲁氏菌病是牛羊养殖业中重要的传染性疾病，在养殖中要提高养殖人员的防疫意识，保证人畜的健康。加强防疫工作的管理力度，认真落实好各个部门的责任，将具体的责任落到实处，提高防疫的效果，防疫站应该负起自身的责任，加强对牛羊的检疫，做好日常养殖中的消毒工作，一旦检测出疫病的存在，对养殖地区进行全面的消毒，防止疫情的扩散。

3.3 加大资金的投入力度加大资金的投入力度也能提高防疫的效果，政府应该重视对基础设施的建设，建立疫苗技术试验基地，购买最新的设备，聘请专家研究牛羊布鲁氏菌病的防疫对策，提高防治的效果。重视对布鲁氏菌病防疫工作的推广，可以借助互联网技术的力量，在官网中传播动物防疫工作的信息，加大对防疫工作的人事宣传力度，让更多的人认识到该病的危害。引导养殖户利用网络平台掌握最新的养殖技术，能够通过互联网平台掌握布鲁氏菌病的防疫技术，从整体上提高防疫的效果。

3.4 完善防疫体系相关部门要建立疫病防疫制度，完善防疫体系，保证牛羊布鲁氏菌病防疫工作的顺利开展。随着经济的发展和科技水平的进步，需要科研工作者不断努力和实验研究出最先进的诊断方法，为布鲁氏菌病的治疗提供有效的数据支持，确保布鲁氏菌病防控工作的顺利开展。