陈骏良， 池杨峰， 宁凤玲， 王 利， 吴晓涵， 臧赢君，陈 静， 张雪梅， 王 浩

(1. 上海中医药大学附属普陀医院肾脏内科，上海 200062； 2. 复旦大学药学院，上海 201203)

水肿是肾病综合征(nephrotic syndrome, NS)的常见临床表现，近年来研究认为肾脏集合管上皮钠离子通道(epithelial sodium channel, ENaC)激活所致原发性钠潴留是引起NS水肿的重要致病机制[1-3]。ENaC由α、β、γ 3个亚基组成，其在集合管顶膜上的表达量是决定通道活性的重要因素，并与腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)密切相关[4]。AMPK可使泛素连接酶Nedd4-2发生磷酸化，增强其与ENaC间的结合作用，促使ENaC发生泛素化并被细胞内吞降解，最终导致ENaC膜表达量下降，该AMPK/Nedd4-2/泛素化通路是调控ENaC活性的重要机制[5-7]。

传统中医理论认为水肿的形成与正气不足、气水失运有关，益气扶正是水肿的重要治法。黄芪汤始载于北宋《仁斋直指方论》，由黄芪、茯苓、麦门冬、五味子、生地黄、瓜蒌根和炙甘草七味药组成，有益气养阴、扶正祛邪之效，本课题组在临床实践中发现该方可有效改善NS水肿，但其现代药理学机制尚不明确。根据既往研究基础[8-11]，推测黄芪汤对NS水肿的治疗机制可能在于其可激活AMPK/Nedd4-2/泛素化通路，从而抑制ENaC活性，减轻水钠潴留。基于该科学假设，本课题组研究了黄芪汤对小鼠肾皮质集合管上皮细胞(M-1细胞)ENaC的干预作用及AMPK/Nedd4-2/泛素化通路在其中的调控效应，初步阐明了黄芪汤利水作用的药理机制，为改善NS水肿的临床疗效提供了研究基础和启示。

1 材料与方法

1.1 黄芪汤提取物的制备

黄芪汤方剂组成(g)： 黄芪20、茯苓20、麦门冬20、五味子10、生地黄30、瓜蒌根20和炙甘草10。……