李盛杰 江海涛 吴雨龙

摘要：为了建立一种快速、灵敏、便捷的针对霍乱弧菌的检测方法，利用多酶恒温核酸快速扩增技术，对不同引物组在胶体金试纸条检测中的特异性和灵敏度进行研究。研究结果表明，在以质粒为模板的特异性试验中，Probe1+引物对2、Probe1+引物对3、Probe2+引物对5这3组引物组均显示出较高的特异性。但在灵敏度试验中，仅有Probe2+引物对5能够检出浓度为0.1 fg/μL的质粒模板。在后续以核酸为模板的特异性和灵敏度试验中，Probe2+引物对5的引物组合同样显示出较强的特异性，并对核酸模板的检出限可达到10 fg/μL，均显示出优于另外2种组合的特异性和灵敏度。本研究所建立的基于MIRA技术的霍乱弧菌检测方法具有较高的特异性和灵敏度，对于推进霍乱弧菌及其他致病菌的现场快速检测具有重要意义。

关键词：霍乱弧菌;多酶恒温核酸快速扩增技术;胶体金试纸

中图分类号：S182 文献标志码： A

文章编号：1002-1302（2021）24-0167-05

收稿日期：2021-09-27

基金项目：国家重点研发计划（编号：2019YFC1605800）;江苏省高校自然科学研究重大项目（编号：20KJA416003）;江苏省高校重点建设实验室项目（编号：苏教科[2016]8）。

作者简介：李盛杰（1988—），男，江苏徐州人，博士，讲师，从事特殊生物质资源利用研究。E-mail：lishengjie@njxzc.edu.cn。

通信作者：吴雨龙，博士，高级实验师，从事动物生理生化相关研究。E-mail：wuyl_8080@163.com。

霍乱弧菌（Vibrio cholera）是一种革兰氏阴性菌，是霍乱的病原体。霍乱可作为散发性、流行性或地方病发生，以引起严重腹泻和脱水而闻名，如果不及时治疗，可在48 h内导致死亡[1]。研究表明，霍乱弧菌可以通过人类宿主形成高度传染性状态，经排泄到自然环境中，引发霍乱的流行[2]。……