张紫娟，郑苗欣，邓威，饶俊辉，赵青，凌洁玉

（武汉设计工程学院食品与生物科技学院，湖北 武汉 430205）

植酸是多种植物组织中磷的主要储存形式，不能被单胃动物消化。饲料中没有被充分利用的磷，排泄进入环境会导致水体富营养化[1]。植酸还可以螯合金属离子，降低矿物元素在动物肠道中的利用率[2]，影响胃肠道消化酶的活性和蛋白质的利用率[3]。向饲料中添加植酸酶可以有效解决上述问题，目前由真菌所产酸性植酸酶已较好地应用于陆生动物中，但细菌所产中性植酸酶在水产养殖中并未广泛应用[3,4]。这些产植酸酶细菌一般分离自土壤而并非动物，不同水产动物的胃肠道具有差异性[3]。

克氏原螯虾Procambarus clarkii（俗称小龙虾）是重要的淡水特色水产品，经济价值较高。本研究从小龙虾肠道中分离产植酸酶菌株，筛选出了产酶兼抑菌特性的潜在益生菌，通过固态发酵制成同时含有植酸酶和菌体活细胞的产品，促进开发小龙虾新型饲料添加剂以及植酸酶在水产中的运用。

1 材料与方法

1.1 材料

主要原料及试剂：小龙虾购于某农贸市场；麸皮购于淘宝绿牧生态养殖店；植酸钙、植酸钠、钼酸铵、偏钒酸铵、无水乙酸钠等化学试剂均购于国药集团化学试剂有限公司；胰蛋白胨、酵母膏等培养基成分购于北京奥博星生物技术有限公司；细菌基因组DNA 提取试剂盒购于天根生化科技有限公司。

（1）产酶固体筛选培养基：葡萄糖30 g，胰蛋白胨25 g，植酸钙5 g，琼脂20 g，NH4NO35 g，MgSO4·7H2O 0.5 g，MnSO40.01 g，FeSO40.03 g，KCl 0.5 g，水1 000 mL，pH7.0～7.4。121℃灭菌20 min。

（2）液体……