周鹰豪 蔡志军 刘军

β-内酰胺酶环对单环内酰胺类、头孢菌素类、青霉素类等多种抗菌药物具有抗菌活性结构，可损伤细菌胞壁，使其裂解，应用广泛[1-2]。但β 内酰胺酶可对β 内酰胺类抗生素的β 内酰胺环水解，使抗生素结合细菌细胞内膜上的靶位点改变，或难以与细菌靶位结合，使抗菌活性消失或降低，而细菌产生耐药的重要机制为产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）[3-4]。目前临床使用抗生素多为经验性用药，但因不同基因型ESBLs对抗菌药物水解特性不同，增加治疗难度，影响抗菌治疗效果。大肠埃希菌是产ESBLs的主要菌种，随着抗菌药物广泛、大量使用，其耐药现象日益严重。为此，本研究旨在分析产ESBLs大肠埃希菌检出率、基因型分布及其耐药性，为指导临床合理选择抗菌药物提供指导。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 菌株来源 收集2018年1月-2020年1月医院细菌室经患者血液、伤口分泌物、痰液中分离出的大肠埃希菌82株。

1.2 方法

1.2.1 试剂与仪器 美国BD公司的phoenix-100的确证药敏纸片和MH培养基，美国BD公司的phoenix-100全自动细菌鉴定药敏分析仪；分别购自宝生物工程（大连）有限公司、上海博尚生物技术有限公司、美国应用生物系统公司的聚合酶链反应（PCR）反应体系、反应引物、扩增仪。

1.2.2 产ESBLs表型确证实验 采用美国临床实验室标准化研究所（CLSI）推荐的双纸片协同试验法检测产ESBLs表型，将0.5麦氏单位菌悬液均匀涂抹于MH琼脂平板，并分别贴上头孢噻肟/克拉维酸药敏纸片（30/10 μg）、头孢噻肟药敏纸片（30 μg）、头孢他啶药敏纸片（30 μg）、头孢他啶/克拉维酸药敏纸片（30/10 μg），35 ℃下孵育17 h，测量抑菌圈，抑菌圈直径减去不含克拉维酸药敏纸片所产生的抑菌圈直径≥5 mm，则结果评定为产ESBLs阳性菌株。……