高效液相色谱法测定健胃散中熊果酸的含量
2021-01-05李华岑刘素梅邱天宝
李华岑,刘素梅,邱天宝,韩 江
(1.河南省兽药饲料监察所,河南 郑州 450008;2.河南牧业经济学院)
健胃散是《中国兽药典》(2015年版)中的经典方剂,其功效为消食下气,开胃宽肠。大量的临床实验证明健胃散能预防和治疗胃肠道疾病,能提高动物的生长性能。为提高健胃散质量标准,建立了一种高效液相色谱法测定健胃散中熊果酸的含量的新方法,该法简单、准确,可以较好地控制健胃散中熊果酸的含量。
1 仪器与试药
1.1 仪器与设备
Waterse2695高效液相色谱仪,配紫外检测器;XBridge®C18色谱柱;METILERXP205电子天平。
1.2 试药及试剂
山楂、槟榔、六神曲、麦芽、熊果酸对照品(中国食品药品检定研究院,批号:111742-201823),甲醇、乙腈为色谱纯试剂,水为超纯水,其他试剂为分析纯。
2 实验方法
2.1 色谱条件
XBridge®C18色谱柱(5μm,4.6NN 150mm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(80∶20),柱温为25℃,检测波长为210nm,进样量为10μl。
2.2 标准工作液的制备
精密称取熊果酸对照品10mg,置100ml容量瓶中,加甲醇适量,超声溶解,加甲醇稀释至刻度线,摇匀;使用时用0.45μm的微孔滤膜过滤,即得。
2.3 供试品溶液的制备
取健胃散阳性样品1g,精密称定,置50ml容量瓶中,加甲醇至近刻度,超声30min,加甲醇至刻度线,摇匀,即得;取健胃散阴性样品0.68g,精密称定,置50ml容量瓶中,加甲醇至近刻度,超声30min,加甲醇至刻度线,摇匀,即得。
3 结果与讨论
3.1 线性与范围
精密称取熊果酸对照品10mg,置100ml容量瓶中,加甲醇适量,超声溶解,加甲醇稀释至刻度线,摇匀;使用前用甲醇稀释成浓度为5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、50μg/ml、100μg/ml的标准工作液,备用,使用时用0.45μm的微孔滤膜过滤,注入液相色谱仪,保存色谱图,用对照品溶液浓度与相应组分峰面积计算回归方程和相关系数。……
