水产品中食源性病原菌多重PCR快速检测方法的建立
2021-01-05母润红聂丹丹李明成高丽君刘晓蓉
北华大学学报(自然科学版) 2020年6期
母润红,聂丹丹,李明成,马 丽,赵 明,高丽君,刘晓蓉
(1.北华大学基础医学院,吉林 吉林 132013;2.长春海关技术中心,吉林 长春 130021;3.北华大学医学技术学院,吉林 吉林 132013)
据世界卫生组织统计结果[1]显示:每年大约有60%~70%食源性疾病是由食源性病原体引起的,并且食物中毒人数逐年增多,因此,食品安全是迫切需要解决的问题.水产品在捕捞、储藏、加工、运输过程中等易受到病原微生物的污染,水产品中食源性病原菌的准确、快速检测是保证其食品安全的首要措施.建立针对水产品中沙门氏菌、单细胞增生李斯特菌、副溶血性弧菌和霍乱弧菌4种食源性致病菌的快速检测方法,对我国食品安全具有保障作用.细菌性病原体传统的检测方法有细菌培养周期长、操作步骤繁琐、耗时等缺点,很难满足食源性病原体快速检测的需求[2].多重PCR检测技术具有高效、灵敏、准确的特点,利用分子生物学技术可同时检测多种致病菌,节约时间,提高效率,已广泛应用于食源性致病菌的检测[3-5].目前,国内外对多种食源性致病菌的多重PCR检测方法也有报道,但针对同时鉴定水产品中4种病原菌的多重PCR研究鲜有报道.
本试验对设计特异性引物和多重PCR退火温度反应条件等进行优化,以探索能同时检测沙门氏菌、单细胞增生李斯特菌、副溶血性弧菌和霍乱弧菌的多重PCR技术,为水产品中病原菌的快速检测提供依据.
1 材料与方法
1.1 试验材料
目标菌株:沙门氏菌(ATCC 12011)、单核细胞增生李斯特……
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