袁绍莉，徐宁宁

（徐州生物工程职业技术学院，江苏徐州 221006）

有关文献[1-5]利用HPLC-UV 联用测定黄芪甲苷含量。经紫外扫描，黄芪甲苷在203 nm 波长处有最大吸收，但处于末端，吸收值较弱，检测结果不明显，易受溶剂及杂质因素影响。本研究拟用HPLC-ELSD 联用的方法测定黄芪甲苷的含量。

1 仪器与试剂

高效液相色谱仪，Agilent1260，C18-ODS（4.5 μm）色谱柱。

乙腈、甲醇，色谱纯；水为重蒸馏水；黄芪甲苷，中国药品生物制品检定所；产妇宁颗粒和不含黄芪的阴性对照品，徐州生物工程职业技术学院。

2 实验部分

2.1 色谱条件的选择

（1）色谱柱的选择

C18-ODS 反相柱，填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶。

（2）流动相的选择

①甲醇-水（75∶25）时，出峰时间4 min，峰形分离不好；②乙腈-水（25∶75）时，出峰时间过长，相对浪费时间；③乙腈-水（32∶68）时，分离度良好，峰形对称，拖尾因子在规定范围内，出峰时间约在16 min。理论板数以黄芪甲苷峰计不低于4 000，积分定量准确。所以，确定了乙腈-水（32∶68）的流动相较为适宜。

（3）检测器的选择[6]

蒸发光散射检测器具有专属性强，灵敏度高，不受杂质成份干扰等优点，并且在文献中有较成熟的测定方法。所以，确定采用高效液相色谱法-蒸发光散射检测器测定黄芪甲苷的含量。

（4）供试品溶液的制备

精密量取本品1 g，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次 20 mL，合并正丁醇液，用 1% 氢氧化钠溶液20 mL 洗涤，弃去氢氧化钠液，继续用正丁醇饱和的水洗涤至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5 mL 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

（5）对照品溶液的制备

取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL 含 0.24 mg 的溶液，即得。……