李沛青 王忠 刘梦颖

青海省粮油检测防治所 青海西宁 810000

砷的生物毒性与其存在形态有关。砷的主要形态有亚砷酸盐（As3+）、砷酸盐（As5+）、一甲基砷（MMA）、二甲基砷（DMA）、砷甜菜碱（AsB）、砷胆碱、砷糖等。GB5009.11-2014 食品安全国家标准食品中总砷及无机砷的测定中关于无机砷的测定方法采用了 HPLC-AFS 联用作为第一法对无机砷（As3+、As5+）进行含量测定。笔者通过改善洗脱条件与流动相条件，建立砷形态的快速分析方法[1]。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

SA-50 型液相原子荧光联用仪，连接AFS-8220 原子荧光检测器。盐酸，硼氢化钾，磷酸二氢铵、氢氧化钾购自国药集团。亚砷酸根、二甲基砷、一甲基砷、砷酸根均使用中国计量院生产的标准物质（配制方法略）。

As（III）中间液（1ppm）、MMA 中间液（1ppm）、As（V）中间液（1ppm）、混合标准溶液（20ppb）。

1.2 仪器条件

HPLC 条件：汉密尔顿阴离子色谱柱，保护柱。流动相为15mM 磷 酸 二 氢 铵（pH=6），1mM 磷 酸 二 氢 铵（pH=9），20mM 磷酸二氢铵（pH=8）。液相泵流速对比试验，洗脱方式：梯度洗脱1.2.2HG 条件：7% 盐酸，2% 硼氢化钾/0.5% 氢氧化钾[2]。

1.3 标准曲线绘制

亚砷酸根（GBW08666）和砷酸根（GBW08667），配制标准溶液（配置方法略）。

2 结果与讨论

对比试验一： 液相泵流速分别设置为1mL/min 和1.5mL/min，采用等度方法对比灵敏度和出峰时间。

如谱图1：

3 结论

等度方法，使用1.5mL/min 流速时灵敏度高，出峰时间短。实验2：液相泵流速分别设置为1mL/min 和1.5mL/min，采用梯度法对比灵敏度和出峰时间[3]。

谱图编号保留时间（min） 峰高（If）噪声As（III）DMA MMA As（V） As（III）DMA MMA As（V）2ppb-1mL 2.419 3.117 6.807 10.368 112.8 33.5 41.4 16.9 10 2ppb-1.5mL 1.648 3.525 4.235 8.213 153.1 37.9 56.9 24.4 14

如谱图2：

红色谱线 1.5mL/min 梯度蓝色谱线 1.0ml/min 梯度

4 结语

本次研究的结果证明，HPLC-HG-AFS 测定砷形态样品，在实际样品测定中，不仅可以有效地将砷形态进行分离，也可以大大节约砷形态的检测时间。