陆峥琳，黄瑞松，梁子宁

（1.广西国际壮医医院，南宁 530001；2.广西中医药大学，南宁 530001）

白饭树（Flueggea virosa）又名白倍子、鱼眼木、白鱼眼、棵拉把、棵三多等［1-3］，为大戟科植物白饭树的干燥全株［4］。在广西多有分布，为壮族民间常用药材。壮医认为，该品苦、微涩，凉，有小毒，具有清热毒、除湿毒之功效，用于能唅能累（湿疹）、头疮、呗脓显（脓疱疮）、呗脓（痈肿）、发旺（痹病）［3］。现代研究表明，白饭树具有祛风除湿、清热解毒、消肿止痛、杀虫止痒、止血等作用［5-7］。查阅历版《中国药典》和《广西中药材标准》等地方标准，均未见有白饭树质量标准的收载。为确保壮药白饭树临床用药的安全有效和生产的质量可控，本研究采集15批不同产地白饭树样品，对其进行质量标准研究，分别建立了性状、鉴别（显微和TLC鉴别）、检查（水分、总灰分和酸不溶性灰分）、浸出物和含量测定等质量控制方法，为壮药白饭树质量标准的制订提供依据。

1 材料与方法

1.1 试药

白饭树药材采自广西15个不同产地，具体信息见表1。经广西国际壮医医院黄瑞松主任药师鉴定，为大戟科植物白饭树，其中以8号样品作为对照药材；硅胶G薄层板（青岛海洋化工厂分厂，批号20131118；烟台化工研究所，批号20110308）；没食子酸对照品（中国食品药品检定研究院，批号110831-201204）；岩白菜素对照品（中国食品药品检定研究院，批号111532-201203）；HPLC流动相所用甲醇和乙腈均为色谱纯（德国Merck公司），水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

表1 15批白饭树药材信息

1.2 仪器

DMB-1223生物显微镜、Motic成像系统（厦门市麦克奥迪实业有限公司）；101-2-S-Ⅱ电热恒温鼓风干燥箱（上海跃进医疗器械有限公司）；SX系列箱式电阻炉（绍兴市沪越科学实验仪器厂）；安捷伦1260高效液相色谱仪（带自动进样器及VWD检测器，美国安捷伦公司）；KQ-3200DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；XS205十万分之一电子分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；EASY PUREⅡ超纯水器（美国热电公司）。

1.3 方法

1.3.1 性状鉴别 采用经验方法（眼看、手摸、鼻闻、口尝）对15批白饭树药材的大小、质地、形状、气味进行观察，确定药材性状。

1.3.2 显微鉴别

1）横切面观察。分别取白饭树的根、茎、叶，按石蜡切片法制作横切面片，进行横切面观察。

2）粉末观察。取白饭树干燥品粉碎，过60目筛，将粉末放置载玻片上，滴加水合氯醛1～2滴透化，再滴加稀甘油1～2滴装片，观察；或直接滴加稀甘油装片观察淀粉粒，确定药材的显微特征。

1.3.3 TLC鉴别

1）TLC鉴别一。取本品粉末0.4 g，加75%甲醇20 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加1 mL甲醇溶解，作为供试品溶液。另取白饭树对照药材0.4 g，同法制成对照药材溶液。再取没食子酸对照品，加甲醇制成1 mg/mL的对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2015年版通则0502）试验，吸取上述3种溶液各1～3μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲酸（5∶4∶0.5∶0.5，V∶V）为展开剂展开，取出晾干，喷1%铁氰化钾溶液-1%三氯化铁溶液（1∶1，V∶V）混合溶液（临用时配制），放至斑点显色清晰。

2）TLC鉴别二。取岩白菜素对照品，加甲醇制成1 mg/mL的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2015年版通则0502）试验，吸取上述供试品溶液、对照品药材溶液各1～2μL，及上述对照品溶液2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇（5∶4∶2，V∶V∶V）为展开剂展开，取出晾干，喷1%三氯化铁溶液-2%铁氰化钾溶液（1∶1，V∶V）混合溶液（临用时配制），放至斑点显色清晰。

1.3.4 检查与浸出物测定 分别参照《中国药典》2015年版通则0832水分测定法“第二法（烘干法）”和通则2302灰分测定法测定15批样品水分、总灰分和酸不溶性灰分。以乙醇为提取溶剂，参照《中国药典》2015年版通则2201醇溶性浸出物测定法项下的“热浸法”测定15批样品的浸出物。

1.3.5 岩白菜素含量测定

1）溶液制备。参照文献方法［8］，取甲醇溶液作为阴性对照溶液；取岩白菜素对照品，加甲醇制成60μg/mL的对照品溶液；取白饭树药材粉末（过四号筛）0.5 g，加甲醇25 mL以超声波法提取作为供试品溶液。

2）测定条件。参照文献方法［8］，拟定波长275 nm；色谱柱为依利特SinoChrom ODS-BP（5μm，4.6 mm×250 mm）；进样量10μL；流动相为甲醇-水（15∶85）；流量1.0 mL/min；柱温25℃；理论板数按岩白菜素计算应不低于2 000。

3）样品含量测定。分别取15批不同产地白饭树药材粉末（过四号筛）0.5 g，按上述方法制备供试品溶液，进样测定。

2 结果与分析

2.1 药材形状特征

白饭树药材的根多呈圆锥形，上粗下细，有分枝，长短不一，表面灰黄色至黄棕色，有细纵纹，枝根细；质硬，断面浅棕黄色。茎圆柱形，褐色至红褐色，直径0.5～2.5 cm，小枝具纵棱。单叶互生，叶柄长3～6 mm，叶片纸质，皱缩或脱落，完整者展平后长圆形、倒卵形至椭圆形，长1.0～5.0 cm，宽1.0～3.5 cm，先端钝圆而有极小的突尖，基部楔形，全缘，上面绿色，下面灰白至灰棕色。偶见花多朵簇生于叶腋或单生，花小，雌雄异株。偶见蒴果，近圆球形，直径3～5 mm，浅黄棕色至黄棕色。气微，微涩（图1）。

图1 白饭树性状

2.2 显微特征

2.2.1 根横切面特征 木栓层细胞3～5列，细胞类方形，排列紧密，外侧有残留落皮层，皮层较宽，细胞类圆形，稍切向延长，排列疏松。韧皮部较窄，细胞呈多边形。形成层明显。木质部导管口径较大，10～50μm，多单个散在或多个相聚，木射线明显（图2）。

图2 根横切面

2.2.2 茎横切面特征 木栓层细胞2～3列，细胞类方形，排列紧密，可见皮孔，皮层较薄，细胞类圆形。韧皮部的纤维束断续环状排列，形成层明显。木质部导管呈纵向排列，木纤维较多，呈放射状排列（图3）。

2.2.3 叶横切面特征 上、下表皮细胞均一列，类椭圆形或椭圆形，上表皮细胞较下表皮大；叶肉栅栏组织1～2列，长圆柱形，排列紧密；海绵组织的细胞近圆形或不规则形，排列疏松，但细胞间隙较大；叶脉上下表皮内侧具1～6层厚角组织细胞，其薄壁细胞内含分泌物质或草酸钙簇晶，维管束呈半月形，木质部在上方，导管纵向排列，形成层明显，韧皮部在下方（图4）。

图3 茎横切面

图4 叶横切面

2.2.4 粉末特征 粉末呈淡黄色或棕黄色。淀粉粒多见，单粒直径2～15μm，脐点为点状或一字状，复粒由2～3粒组成。导管多为具缘孔纹导管，直径17～57μm；纤维成束或散在，直径10～25μm；草酸钙簇晶多见，直径7～32μm，多存在于薄壁细胞中（图5）。

图5 粉末显微

2.3 TLC鉴别结果

在日光下检识可见，各批次白饭树供试品色谱在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；分别在与没食子酸及岩白菜素对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色斑点，薄层色谱分离效果好，斑点圆整清晰，比移值适中，重现性好。结果分别见图6、图7。

图6 没食子酸TLC色谱

图7 岩白菜素TLC色谱

2.4 检查与浸出物测定结果

测得15批药材的水分为10.3%～11.3%，总灰分为2.6%～5.0%，酸不溶性灰分为0.04%～0.40%。15批样品醇溶性浸出物为9.4%～13.4%（表2）。在供试品和岩白菜素对照品溶液色谱相应位置上，有相同保留时间的色谱峰，而阴性对照则无干扰，表明该方法专属性强，无阴性干扰（图8）。15批样品按药材干燥品计算，岩白菜素含量为0.096%～1.430%，平均含量为0.720%。

表2 水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物含量测定结果（n=2） （单位：%）

图8 高效液相色谱

3 小结与讨论

对15批白饭树药材进行性状和显微观察，总结药材形状特征为：根外皮灰黄色至黄棕色，质硬；茎褐色至红褐色，小枝具纵棱；单叶互生，叶片近革质，长圆形、倒卵形至椭圆形，上面绿色，下面灰白至灰棕色。药材以茎坚实、枝叶茂盛者为佳。显微鉴别要点为：根横切面木质部导管口径较大，木射线明显，呈放射状；茎同一横切面不同部位的韧皮部宽窄不一；粉末中淀粉粒和草酸钙簇晶多见。

试验中曾对建立的TLC方法进行了耐用性考察。结果表明，本研究建立的TLC方法对不同品牌预制板（青岛海洋化工厂和烟台市化学工业研究所）、不同展开温度（8℃和30℃）、不同湿度（55%和88%）和不同点样方式（点状和条带点样）均显示较好的薄层层析效果，说明该方法耐用性良好。TLC结果显示，14批白饭树药材与对照药材在相应的位置上，均能检出没食子酸、岩白菜素，且斑点明显，无干扰。说明建立的TLC鉴别方法专属性强，可用作白饭树的质量标准控制方法。

试验对白饭树药材的水分、总灰分、酸不溶性灰分及醇溶性浸出物进行测定。根据试验结果，综合储存条件等各种因素考虑，拟定药材标准的水分不超过13.0%，总灰分不超过6.0%，酸不溶性灰分不超过2.0%，醇溶性浸出物不低于8.0%。

白饭树含有岩白菜素，具有良好的镇咳和治疗胃肠道疾病如胃溃疡、腹泻及便秘的作用。此外，还具有良好的抗炎、抗心律失常、抗病毒、护肝作用［9-14］，是该药材活性成分之一。因此，建立白饭树岩白菜素含量测定方法，对于控制该药材质量具有重要意义。研究参考文献［8，15，16］，采用HPLC法，建立白饭树药材中岩白菜素含量测定方法，测得15批样品岩白菜素含量为0.096%（南宁市隆安县）～1.430%（南宁市上林县）。研究采集的药材批次有限，测得样品含量差异较大，考虑到今后样品来源产地和采收季节不同，标准拟定岩白菜素含量按干燥品计不得低于0.30%。

试验建立的广西产壮药白饭树质量标准中的性状、显微鉴别、薄层鉴别、检查（水分、总灰分和酸不溶性灰分）、浸出物和含量测定等质量控制方法，经方法学考察均符合药材质量标准制订技术要求，方法可靠简便，可用于控制白饭树药材质量。该药材质量标准已收入《广西壮族自治区壮药质量标准（第三卷）》［17］，在白饭树药材的生产、流通、使用、检验和管理监督等方面将产生较好的经济和社会效益。