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免疫亲和层析技术检测食品安全

2020-12-14张家琪王沁园曹芙榕王海默徐晨

科学与财富 2020年28期
关键词:应用发展

张家琪 王沁园 曹芙榕 王海默 徐晨

摘 要:免疫亲和层析技术是食品安全检测技术之一,主要应用于生物大分子的分离、纯化。在食品安全的检测中,对许多大分子蛋白质等有较准确的检测效果。可以根据抗原抗体可以特异性结合的特性,有针对性的检测某种物质在食品中是否存在或存在的量有多少。

关键词:免疫亲和层析;应用;发展

Abstract: immunoaffinity chromatography is one of the food safety detection technologies, which is mainly used in the separation and purification of biomacromolecules. In the detection of food safety, it has a more accurate detection effect on many macromolecular proteins. It can be used to detect the presence or quantity of a substance in food according to the specific binding characteristics of antigen and antibody.

Key words: development of immunoaffinity;chromatography

免疫亲和层析技术的原理

亲和层析是一种吸附层析,是利用生物大分子间作用,将具有亲和力的配体固定在一个不溶性基质上,利用分子间特异性的亲和力来分离纯化目标物[1],免疫亲和层析柱是利用抗体与其相应的抗原之间存在高度亲和性与高度特异性的特点,将抗原或是抗体固定到层析柱上,将含有抗原或抗体的样品上样,然后利用有效手段和溶剂将固定到层析柱上的抗原或是抗体进行洗涤和洗脱,将杂质洗掉,将特异性结合的目标物质洗脱下来[2]。

免疫亲和层析技术在食品安全检测中已经有了许多应用,免疫亲和层析技术的发展和应用离不开免疫亲和柱的发展和作用。

免疫亲和柱

免疫亲和柱(IAC)是利用免疫亲和层析原理制成的用于纯化、富集目标分离物的免疫亲和柱,它可以简化样品提取的过程,并能提高样品的纯度,对目标物能起到很好的分离、纯化富集的作用,所以IAC常被用作待测样品的前处理。免疫亲和柱的发展经历了较为仓时间的发展,我国免疫亲和柱法的研究和发展不仅离不开早期国外科学家的探索,更离不开我国科学家用于实践的精神。国外学者Axen等从利用溴化氰活化的琼脂糖作为载体开始,接着Van等于1987年首次制备出净化猪肉中的氯霉素的免疫亲和柱,此后利用免疫亲和柱进行样品前处理的技术在医药和食品检测领域广泛盛行,我国李卫岗等[3]将自制的抗黄曲霉毒素B1的抗体与溴化氰活化的琼脂糖4B偶联,制成免疫亲和柱用于分离、纯化,富集小分子物质获得成功,这无疑为我国其他领域进一步研究免疫亲和柱法,打下了良好的基础。[4]

免疫亲和柱可以得到认可,与它的特性密不可分。IAC比普通的亲和色谱具有更高的亲和力、可逆性和特异性[5],它最大优点在于可以得到较高纯度的目标活性物质,且操作步骤简单,花费时间也较少,IAC是用于分离、纯化的方法中效率比较高的方法之一。只要掌握好抗原与抗体的初浓度,抗原与抗体之间的亲和力和抗原与抗体是否容易解离这三个方面,就能夠利用IAC的优良特性分离、纯化得到高纯度的目标活性物质。

免疫亲和层析的应用

免疫亲和层析因为操作简单、可定量分析、可以简单化样品处理过程和检测时间等优点,近几年的应用范围日益壮大,已经广泛应用于环境保护、医学检验、食品卫生等领域,对各类样本中的毒素、兽药残留等具有很高的纯化、富集效率,已成为和睦多领域中重要的前处理手段之一。[6-10]

发展前景

免疫亲和技术不需要使用大量的有机溶剂,对操作人员的健康不会造成极大的危害,有因为它相对更容易掌控,所以,正处于飞速发展的免疫亲和层析技术未来一定会应用在更多的发展领域。不管是对生活还是生产都会起到一个推动其向着更好、更安全的方向发展

参考文献:

[1] 陆健.蛋白质纯化技术及应用[M].北京:化学工业出版社,2005,137-139.

[2] PRASSOPOULOUE,KATIKOUP,GEORGANTELIS D,et al.Detection of okadaic acid and related esters in  mussels during diarrhetic shellfish poisoning (DSP) episodes in Greece using the mouse bioassay, the  PP2A inhibition assay and HPLC with fluorimetric detection[J].Toxicon,2009,53(2):214-27.

[3] 李卫岗,鲁长豪,叶梅君,等.黄曲霉毒素 Bl 免疫亲和柱的制备研究[J].中国公共卫生学报,1992,6(11):361-362.

[4] 李琳. 大田软海绵酸免疫亲和柱的开发及初步应用[D].吉林大学,2015.

[5] 魏文忠,魏琴.免疫亲和柱技术在粮油卫生安全检测中的应用研究[J].粮食科技与经济.2014,2(39):32-35.

[6] 吴长青,冯俊,沈浥,张玉柱.动物源性食品中抗生素残留的分类及检测方法的研究进展[J].食品安全质量检测学报,2019,10(21):7126-7132.

[7] 李唐,黄永震,姜艳芬,张彦明,贺花.动物性食品药物残留的检测方法和防控对策[J].食品工业,2019,40(07):260-265.

[8] 杨杰程,刘丁溪,郭抗抗,周宏超.动物性食品中磺胺类药物残留检测方法研究进展[J].畜牧与兽医,2019,51(06):134-139.

[9] 李琳. 大田软海绵酸免疫亲和柱的开发及初步应用[D].吉林大学,2015.

[10] 王刘庆,姜冬梅,王瑶,王蒙.果品及其制品中赭曲霉毒素A污染的发生、控制和检测[J].食品科学,2018,39(23):289-298.

作者简介:

姓名(出生年、性别):张家琪 1998年 女,籍贯:山东省荣成市,职称和学历:大学本科,研究方向或专业:水产养殖学。

第二作者: 王沁园

第三作者:曹芙榕 第四作者:王海默  第五作者:徐晨

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