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乙型肝炎病毒血清学标志物检测技术的发展历程

2020-12-13张学东卢建华王梦寒戴二黑

分子诊断与治疗杂志 2020年6期
关键词:检测

张学东 卢建华 王梦寒 戴二黑★

自从1965年美国巴鲁克·布伦博格博士(Baruch Blumberg)发现澳大利亚抗原即乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)以来,至今已有50 多年的历史[1],乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染的实验室检测方法不断涌现和更新换代,HBV DNA、HBV RNA、HBV cccDNA 定量检测、HBV 基因型与基因突变位点检测、HBV 核心相关抗原(HBcrAg)检测等新技术、新方法相继问世并在临床逐渐推广应用[2-6]。与此同时,传统的HBV 血清学标志物如常用的HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc 乙肝“两对半”等检测技术也不断创新发展[7],从最初的免疫扩散技术相继建立了对流免疫电泳技术(CIEP)、红细胞凝集试验、放射免疫分析试验(Rodio Immunoassay,RIA)、酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)、固相膜免疫分析技术、化学发光免疫分析技术(chemiluminescent immunoassay,CLIA)等。

本文重点对以上HBV 血清学标志物检测技术的原理及其特点进行简要介绍,旨在帮助大家在正确地了解HBV 血清学标志物检测方法的基础上,根据各单位的实际情况科学合理的选用这些技术。

1 HBV 血清学标志物检测技术

1.1 对流免疫电泳技术

对流免疫电泳是将双向免疫扩散与电泳相结合,在直流电场中定向加速的免疫扩散技术。1970年,Gocke、prinee 等用对流免疫电泳技术检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和表面抗体(HBsAb),取得了较好的效果而被推广应用[8];中国学者余乾炎和张志荣也在HBsAg 上做了相应研究[9]。该试验相对简单、快速,灵敏度相比双向免疫扩散试验提高8~16 倍,可测定的蛋白质浓度最低限度达μg/mL 水平。该方法常用于抗原或抗体的性质、效价和纯度的测定,但不适用于抗原为免疫球蛋白或抗原抗体迁移率接近的情况,否则会导致抗原抗体朝同一个方向泳动[9]。……

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