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复方乌鳢口服液对产后抑郁症模型大鼠行为学的影响

2020-12-09何清林田翔宇杨玉奇

实用中医药杂志 2020年9期
关键词:抗抑郁口服液复方

何 娜,魏 云,何清林,聂 晶,田翔宇,罗 维,杨玉奇

(1.湖南农业大学2017级在职硕士研究生,湖南 长沙 410128;2.湖南医药工业研究所,湖南 长沙 410013;3.明瑞制药有限公司,湖南 浏阳 410331;4湖南斯莱克景达实验动物有限公司,湖南 长沙 410013)

复方乌鳢口服液是由鲜乌鳢、黄芪、大枣等组成,主要用于促进创伤、外科手术、分娩后的伤口愈合及伤后头面虚肿、心悸气短、神疲自汗等症。临床应用发现其对分娩后情绪郁闷症有一定疗效[1-2]。本实验探讨了复方乌鳢口服液抗抑郁的药效作用及机制,报道如下。

1 材料与方法

药物:复方乌鳢口服液,规格10mL/支,生药含量为1.062g/mL,批号160109,由湖南明瑞制药有限公司提供。盐酸帕罗西汀片,规格20mg/片,由浙江尖峰药业有限公司提供,批号150101。地塞米松磷酸钠注射液,规格1mL∶5mg,济南利民制药有限责任公司,批号15120602-1。

动物:受孕SD大鼠,60只,250~280g,SPF级,由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供,饲养于SPF级实验室,温度20℃~26℃,湿度40%~70%。实验动物质量合格证号为No.43004700015835。

仪器与试剂:DNM-9606酶标分析仪,北京普朗新技术有限公司。5-HT检测试剂盒,由Cusabio提供,批号C0969790372。

方法:将60只受孕大鼠随机分为6组,分为对照组,模型组,阳性对照组,复方乌鳢口服液低剂量组、中剂量组、高剂量组,独笼饲养。除对照组外,其余各组大鼠自受孕第1天起,皮下注射,注射用水1mL/kg;至受孕成功第15天开始,皮下注射地塞米松磷酸钠0.2mg/kg,直到产崽。产崽后继续给药,模型组用蒸馏水,阳性对照组用盐酸帕罗西汀3.6mg/kg,复方乌鳢口服液低、中、高剂量组用1.8、3.6、7.2mL/kg,连续给药15天。产后4天观察母爱行为(噙崽潜伏期、集窝时间、舔崽时间、噙崽频率),产后10天进行旷场实验(活动性及兴趣性),产后12天进行悬尾实验(绝望不动持续时间),产后15天进行强迫游泳实验(自救持续时间、绝望不动持续时间),产后22天,母鼠腹主动脉取血,采用酶联免疫法检测5-HT含量。

检测指标[3-4]:①关爱行为:于分娩后的第4天,母鼠给药1h后,将幼鼠分散于鼠笼四角,母鼠置于鼠笼中央,在鼠笼正上方100 cm处悬挂摄像机进行记录,记录每只母鼠关爱幼崽行为。噙崽潜伏期,母鼠噙起第1只幼鼠的时间;集窝时间,母鼠将所有幼鼠集中的时间;舔崽时间,母鼠用舌头舔或头部在幼鼠头背和肛门生殖器周围持续3s以上的总时间;噙崽频率,母鼠噙起幼鼠的总次数。②旷场实验:于分娩后的第10天,母鼠给药1h后,用自制OPEN-FIELD敞箱。四周箱壁为黑色,底面用黑线均匀划分为相等面积的25块方格。以动物穿越方格数作为水平活动的得分,以直立次数为垂直活动得分。每只动物仅测定1次,每次3min。每次测试前保持敞箱内干净。旷场试验水平运动的得分反映大鼠的活动性,垂直活动的得分则反映大鼠的兴趣性。③悬尾实验:于分娩后的第12天,末次给药1h后,距大鼠尾尖部约1cm处用胶布贴于悬尾箱支架上,使大鼠成倒挂状态,其头部离箱底约10cm,1次悬挂1只大鼠。悬挂时间为6min,记录大鼠4min内悬尾累积不动时间。④强迫游泳实验:于分娩后的第15天,末次给药1h后,在约60cm高的水桶内放人约30cm高度的37℃温水,距离桶上方100cm处悬挂摄像机进行记录。大鼠持续游泳力竭后继续观察6min,记录游泳不动时间,即大鼠只在水中做少量轻微摆动保持头部不下沉的时间。⑤血清5-HT含量测定:各组动物继续给药7天后,母鼠腹主动脉取血,采用酶联免疫法,用ELISA试剂盒检测5-HT含量。

统计学方法:实验数据以(±s)表示,用SPSS17.0软件进行单因素方差分析,P<0.05为差异有统计学意义,P<0.01为差异有高度统计学意义。

2 结 果

各组关爱幼崽行为比较见表1。与对照组比较,模型组母鼠噙崽潜伏期明显增加,集窝时间显著增加,舔崽时间明显减少,噙崽频率显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,复方乌鳢口服液低、中、高剂量组噙崽潜伏期、集窝时间、舔崽时间、噙崽频率有不同程度的改善作用,差异均有统计学意义(P<0.05)。

表1 各组关爱幼崽行为比较 (±s ,n=10)

表1 各组关爱幼崽行为比较 (±s ,n=10)

注:与对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与模型组比较,#P<0.05。

噙崽频率(次/30min)对照组 - 14.61±2.91 12.08±3.49 62.08±23.84 17.60±5.40模型组 - 17.91±2.99*18.12±5.24**46.04±11.92*10.50±3.17**低剂量组 1.8 17.04±2.87 15.95±4.61 50.65±13.11 13.40±5.54中剂量组 3.6 14.97±3.19#14.50±4.19 50.88±13.17 16.20±6.25#高剂量组 7.2 14.80±3.26#14.08±4.07#55.35±14.38 16.50±6.10#阳性对照组 3.6mg/kg 14.78±3.04#13.90±4.02#55.39±14.34 16.40±7.00#组别 剂量(mL/kg)噙崽潜伏期(s)集窝时间(min)舔崽时间(s)

各组抗抑郁作用比较见表2。与对照组比较,模型组母鼠活动性显著减少,兴趣性有降低趋势,悬尾和游泳绝望不动时间明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,复方乌鳢口服液低、中、高剂量组活动性、兴趣性、悬尾和游泳绝望不动时间有不同程度的改善作用,差异均有统计学意义(P<0.05)。

表2 各组抗抑郁作用比较 (±s ,n=10)

表2 各组抗抑郁作用比较 (±s ,n=10)

注:与对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与模型组比较,#P<0.05。

游泳绝望不动时间(min)对照组 - 50.60±14.12 17.00±6.99 2.22±0.57 2.47±0.38模型组 - 33.40±16.95**12.70±3.92 2.72±0.62* 2.93±0.42*低剂量组 1.8 44.60±10.67 13.60±4.38 2.45±0.42 2.70±0.43中剂量组 3.6 45.00±11.71 14.30±4.52 2.44±0.33 2.54±0.39#高剂量组 7.2 45.80±11.69#15.20±5.01 2.22±0.75# 2.61±0.37阳性对照组 3.6 mg/kg 45.90±12.42#16.10±8.23 2.19±0.44# 2.49±0.41#组别 剂量(mL/kg)活动性(格/3min)兴趣性(次/3min)悬尾绝望不动时间(min)

各组对母鼠血清5-羟色胺含量影响的比较见表3。与对照组比较,模型组母鼠5-HT浓度明显降低(P<0.05)。与模型组比较,复方乌鳢口服液低、中、高剂量组母鼠5-HT浓度有不同程度的改善作用,差异均有统计学意义(P<0.05)。

表3 各组对母鼠血清5-HT含量影响的比较 (±s ,n=10)

表3 各组对母鼠血清5-HT含量影响的比较 (±s ,n=10)

注:与对照组比较,*P<0.05;与模型组比较,#P<0.05。

组别 剂量(mL/kg) 5-HT(ng/mL)对照组 - 6.81±2.50模型组 - 4.49±1.62*低剂量组 1.8 5.09±1.84中剂量组 3.6 5.69±2.06高剂量组 7.2 6.45±2.41#阳性对照组 3.6mg/kg 6.52±2.42#

3 讨 论

PPD主要表现为焦虑、激动、悲伤、沮丧、哭泣、失眠和意识错乱,甚至出现幻觉和自杀倾向。抑郁症属中医“郁证”“癫”等范畴。多因脾肾两虚,肝气郁结,血气凝滞,心失所养,脑失所调,进而发病[3-4]。西医认为PPD病因与5-HT含量降低有关,治疗抑郁症的药物以5-HT作用的靶点,主要通过增加单胺类递质的浓度、增强单胺类神经递质的功能而起到抗抑郁作用[5-10]。

复方乌鳢口服液由乌鳢、黄芪、大枣等组成,具有补血补气及促进伤口愈合的作用。方中乌鳢具有促进伤口愈合、抗炎、杀菌等作用,黄芪具有增强免疫功能作用。Saleem A M等[11]研究发现乌鳢鱼片水提物具有明显抗抑郁作用。韩晓蕾等[12]研究证明黄芪能够降低小鼠抑郁反应,提高抑郁症小鼠血清5-HT含量。研究表明,复方乌鳢口服液能够使PPD母鼠抑郁行为减轻,同时能够使母鼠血清5-HT含量提高,提示复方乌鳢口服液具有一定的抗抑郁作用。

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