宾婕 张郴 晏通 胡建林

【摘 要】 目的：对云南及四川地区的苦荞质量进行综合评价，为苦荞质量监控提供理论依据。方法：收集云南及四川地区的苦荞样品16份，采用药典方法对芦丁、槲皮素、肌醇、水分、浸出物、重金属、砷盐及农药残留量进行测定。结果：16份苦荞样品的芦丁含量在1.02%～2.55%，槲皮素含量在0.12%～0.89%，肌醇含量在0.15%～0.51%，水分含量在7.38%～9.94%，浸出物含量在6.28%～18.22%，重金属及砷盐均符合限量要求，2种农药均未检出。结论：不同产地苦荞有效成分含量有一定差异，有害物质残留均符合规定，规定本品水分不得过10%，水溶性浸出物不得少于10%，醇溶性浸出物不得少于5%。

【关键词】 苦荞;含量测定;重金属;农药残留

【中图分类号】R282.5 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2020）19-0043-04

Abstract：Abjective To evaluate the quality of buckwheat in Yunnan and Sichuan，provide a theoretical basis for the quality control of buckwheat. Methods Collecte 16 samples of buckwheat from Yunnan and Sichuan，Determine the contents of rutin， quercetin， inositol， water， extractives， heavy metal， arsenic salt and pesticide residues by pharmacopoeia method. [WTHZ]Results [WTBZ] In the 16 buckwheat samples，The content of rutin ranged from 1.02% to 2.55%，quercetin ranged from 0.12% to 0.89%，inositol ranged from 0.15% to 0.51%，water content ranged from 7.38% to 9.94%，extractives is between 6.28% and 18.22%，heavy metals and arsenic salts meet the limit requirements，none of the two pesticides were detected.Conclusion The contents of active components in buckwheat from different regions were different， and the harmful substances remained were in accordance with the regulations， which stipulated that the water content of buckwheat should not exceed 10%， the water-soluble extract should not be less than 10%， and the alcohol-soluble extract should not be less than 5%.

Key words：Buckwheat; Content Determination; Heavy Metals; Pesticide Residue

苦荞[Fagopyrum tartaricum（Linn）Gaench]属蓼科荞麦属双子叶植物，多产于云贵高原、黄土高原两地[1]。其根、茎、叶、花、种子及籽壳中都含有大量黄酮类化合物，如芦丁、槲皮素、肌醇。传统医学和现代医学都证实苦荞具有降血糖、降血脂、降尿糖、防便秘等功效[2-3]，被权威专家称为“三降食品”和“21 世纪人类的健康食品”。因此苦荞中芦丁、槲皮素及肌醇含量是评价苦荞功能性优劣的重要指标之一。此外，苦荞中蛋白质含量也较高，有极高的营养和医药价值[4]。荞麦蛋白除能显著降低血液胆固醇浓度，其效果优于大豆蛋白质[5]，还具有抗衰老、抑制大肠癌的发生等作用。随着其临床研究和应用越来越广泛，制订苦荞的质量标准迫在眉睫。由于水分过多会导致霉变，引入安全性问题，且影响食药价值。有效成分的含量多少也直接影响疗效。且有专家提出：重金属、农药残留量检查是中药材走向世界，创立绿色中药名牌产品的中药标志之一[6]。为此，本试验对苦荞中有效成分进行测定，及对水分，浸出物，重金属、砷盐和农药残留进行了检查，旨在为制订苦荞的质量标准提供依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器 LC-2010型高效液相色谱仪（包括四元梯度泵、自动进样器、柱温箱、紫外检测器和蒸发光散射检测器，日本岛津），ODS柱（4.6 mm×150 mm，5μm，岛津）， Luna C18柱（4.6 mm×150 mm， 3μm，Phenomenex公司），SK3200H超声提取器（上海仪器制造厂），CP-224S电子天平（德国赛多利斯）。

1.2 材料 甲醇（色譜纯，美国TEDIA天地试剂公司），乙腈（色谱纯，美国Mallinckrodt Baker公司），水（娃哈哈饮用纯净水），其余试剂均为分析纯。芦丁（批号：09072231）、槲皮素（批号：09120411）对照品购自上海同田生物技术有限公司，肌醇对照品（纯度>98%，鼎瑞化工（上海）有限公司）。苦荞样品分别来自云南和四川。

2 方法与结果

为了对苦荞的内在质量有个全面的认识，分别对产自于云南及四川的16个样品进行了系统性研究，方便对我们的生产使用提供一定的参考依据。

2.1 芦丁、槲皮素、肌醇的含量测定

2.1.1 色谱条件

2.1.1.1 芦丁与槲皮素 岛津ODS柱（4.6 mm×150 mm， 5 μm），以乙腈–水（含2%的冰醋酸）为流动相，洗脱梯度为：0～18 min，乙腈浓度17%～40%，流速：1 mL/min，柱温：25 ℃，检测波长：360 nm。

2.1.1.2 肌醇 HPLC：甲醇- 水（含0.1%的冰醋酸）为流动相， 洗脱梯度为：0～5 min，甲醇浓度10%～30%，色谱柱：Luna C18柱（4.6 mm×150 mm， 3μm），流速：1 mL/min，进样量：6 μL，室温操作。ELSD： 漂移0;管温度5 ℃，载气压力40 psi。

2.1.2 对照品溶液的制备

2.1.2.1 芦丁与槲皮素 精密称取芦丁对照品4.6 mg，槲皮素对照品4.0 mg，分别置于10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，再分别取1 mL至10 mL的容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得芦丁和槲皮素对照品溶液浓度分别为0.046 mg/mL和0.04 mg/mL。

2.1.2.2 肌醇 精密称取肌醇对照品6.7 mg置于25 mL容量瓶中，用超纯水溶解并定容至刻度，摇匀，再精密移取0.5 mL至10 mL的容量瓶中，用超纯水定容至刻度，摇匀，即得对照品溶液浓度为13.4 μg/mL。进样前取适量溶液用0.22 μm微孔滤膜过滤。

2.1.3 供试品溶液的配制

2.1.3.1 芦丁供试品溶液的制备 取苦荞粉末（过60目筛）约100 mg，精密称定，置于25 mL容量瓶中，加入80%乙醇5 mL，在常温下超声（59 KHz）提取30 min，用乙醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。进样前取适量溶液用0.45 μm微孔滤膜过滤。

2.1.3.2 槲皮素供试品溶液的制备 取苦荞粉末（过60目筛）约100 mg，精密称定，置于25 mL容量瓶中，加入50%乙醇4 mL，在常温下超声（59KHz）提取30 min，用乙醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。进样前取适量溶液用0.45 μm微孔滤膜过滤。

2.1.3.3 肌醇供试品溶液的制备 取苦荞粉末（过60目筛）约100 mg，精密称定，置于25 mL容量瓶中，加入40%甲醇溶液4 mL，在常温下超声提取20 min，用相应的甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。进样前取适量溶液用0.22 μm微孔滤膜过滤。

分别取10 μL进高效液相色谱仪，记录峰面积，由线性方程计算各自含量，结果见表1。

2.1.4 线性关系考察

2.1.4.1 芦丁与槲皮素 分别精密吸取2.1.1项下的芦丁和槲皮素对照品溶液0.5、1、5、10、15、20、25 μL和0.5、1、5、10、15 μL， 注入高效液相色譜仪，记录色谱图，测定其峰面积，以进样量X（μg）为横坐标，色谱峰面积Y为纵坐标，绘制标准曲线，芦丁和槲皮素的回归方程和相关系数分别为：Y = 1703415X+9229.6，r=0.9996;Y=3833824 X-11994.2，r= 0.9999。

2.1.4.2 肌醇 精密吸取2.1.2项下的肌醇对照品溶液2、4、6、8、10 μL注入高效液相色谱仪，记录色谱图， 测定其峰面积，以进样量X（μg）为横坐标，色谱峰面积Y为纵坐标，绘制标准曲线，得：Y=156739X+43.2，r=0.9997。

2.1.5 样品含量测定 取不同来源的苦荞粉末适量，精密称定，分别按2.2项下方法制备供试品溶液，按1项下色谱条件进行测定，分别记录芦丁、槲皮素及肌醇的峰面积，由线性方程计算各自含量，测定结果见表1。

2.2 水分的测定 按照《中国药典》（2020年版）中水分测定法（四部通则0832）第二法[7]，根据减失的重量，计算苦荞样品含水量（%），结果见表1。

2.3 浸出物的测定 按照《中国药典》（2020年版）中浸出物测定法（四部通则2201）[7]，分别计算苦荞样品中水溶性浸出物及醇溶性浸出物的含量（%），结果见表1。

2.4 重金属、砷盐残留 按照《中国药典》（2020年版）中重金属检查法（四部通则0821） [7]第二法检查重金属;按砷盐检查法（四部通则0822）[7]第二法检查砷盐，检测结果见表1。

2.5 农药残留 本试验结合荞麦生长期的病害特点和针对性的用药，发现吡虫啉和多菌灵是种植荞麦最常用的农药，故本试验对吡虫啉和多菌灵进行残留量检查，用液-质联用方法进行检测。液相条件：Waters ACQUITY UPLC -MS/MS（API 3200），色谱柱为ACQUITY UPLC ODS柱（2.1 mm× 100 mm，7 μm），以乙腈-水为流动相梯度洗脱：0～2 min，乙腈浓度为15%，2～6 min，乙腈浓度15%～90%，柱温30 ℃，流速0.3 mL/min，进样1 μL。质谱条件：气体为高纯氮气，离子源：电喷雾离子源，扫描方式：正离子扫描，检测方式：多重反应监测，电喷雾电压：5500 V，雾化气压力：0.414 MPa，辅助加热气压力：0.345 MPa，气帘气压力：0.069 MPa，离子源温度：600 ℃。

对照品和供试品的定性结果见图1，检测结果见表1。

3 讨论

研究考察了16个产地苦荞样品的有效成分，其中芦丁含量最高，在1.02%～2.55%，肌醇含量最低，在0.15%～0.51%;且不同产地苦荞中芦丁、槲皮素及肌醇含量有一定差异，说明产地的气候、土壤特性等生态因子及产地加工方式对药材质量影响很大。同产地的苦荞，因加工方式不同含量也有明显差异。根据测定情况和一般养护经验，规定本品水分不得过10%。浸出物含量反映了植物体内生物活性物质的积累情况，与药材质量密切相关[8]。按照测定结果适当下浮来设定指标限度比较符合实际情况，规定本品水溶性浸出物不得少于10%，醇溶性浸出物不得少于5%。

按照国际市场对无公害绿色药材的要求，对不同产地的苦荞进行了重金属、砷盐及农药残留检测，结果表明，苦荞样品符合《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》[9]（中华人民共和国对外贸易经济合作部）规定，及中国药品生物制品检定所《中药中铅、镉、砷、汞测定方法起草说明》[10]中提出的四元素的限量标准，即铅不高于5 ppm，镉不高于0.5 ppm，砷不高于2 ppm，汞不高于0.2 ppm。

本实险对云南及四川地区苦荞的芦丁、槲皮素、肌醇含量、水分、浸出物、重金属、农残进行测定，为科学评价苦荞内在质量积累了科学资料，提供了实验数据。

参考文献

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[3]劉淑梅，韩淑英，霍国金，等.甜荞麦叶总黄酮降糖降脂作用及机制[J].第四军医大学学报，2003，22（19）：1815-1817.

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[9]中华人民共和国对外贸易经济合作部.药用植物及制剂进出口绿色行业标准[S].2001.

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（收稿日期：2020-05-09 编辑：刘 斌）