谢海平,喻佳俊,黄 清,黄木珍,廖凯儒,李绪鹏,黄泽彬,李佰通，刘 平，李 磊

(1.广东省渔业技术推广站，广州 511455；2.暨南大学质谱仪器与大气环境研究所，广州 510632；3.广州禾信康源医疗科技有限公司，广州 510530)

2020年3月初，广州某水体养殖场的加州鲈(Micropterussalmoides)出现身体溃烂发病死亡情况，死亡率2%～3%，初步检查主要症状为：反应迟钝、摄食量减少，直至拒食，鳃上黏液有增多现象，身体多处有溃烂斑，溃烂斑周围发红肿胀，肝脏有白色斑点。镜检鳃部和体表未发现寄生虫。为快速明确疾病原，本研究利用自制的MALDI-TOF MS[9]对从患病加州鲈鱼体上分离到的病原菌进行鉴定，并与自动微生物鉴定系统法进行了鉴定对比，以期确定MALDI-TOF MS是否能对水生动物病原菌进行快速鉴定，并为水生动物疾病治疗或水体环境修复改善提供有效的策略和方法。

1 材料与方法

1.1 材料

患病加州鲈取自广州某养殖场，均重1 500 g/尾，体长为40～50 cm。

1.2 试剂与仪器

脑心浸液琼脂(BHI)培养基(北京陆桥技术有限责任公司)、微生物革兰氏染色检测配套试剂(广东环凯微生物科技有限公司)、药敏纸片(杭州天和微生物试剂有限公司)、大肠埃希菌ATCC 8739标准菌株蛋白提取液(广州禾信康源医疗科技有限公司)、α-氰基-4-羟基肉桂酸、70 %甲酸、乙腈、三氟乙酸；自制的MALDI-TOF MS CMI-1600[9]，较国内外同类型仪器相比，其采用近零斜影光路入射、双脉冲宽质量范围聚焦创新技术以及高频固体激光器，具有高分辨率、高灵敏度和高检测速率等优势；LRH-250生化培养箱(韶关市明天环保仪器有限公司)；……