宋健

摘 要：本文提出了以HPLC-ESI-QTOF-MS法测定减肥保健食品中16种食欲抑制剂，以为检测机构提供理论与实践帮助，保障减肥保健食品的健康使用。

关键词：HPLC-ESI-QTOF-MS法;减肥保健食品;食欲抑制剂

食欲抑制剂会对食用者的下丘脑摄食中枢产生影响，影响食用者食欲，使其产生饱腹感，进而控制进食，达到减肥的目的。长期食用食欲抑制剂使食用者产生依赖性，并出现头晕、恶心、腹泻等副作用，危害食用者的身体健康。就此，在减肥保健食品投入市场前，需做好食欲抑制剂检测工作。

1 实验方法

1.1 实验仪器与试剂

实验选择高效液相色谱—电喷雾離子化—四级杆串联飞行时间质谱仪、旋转蒸发仪及离心机等。

实验试剂包括甲醇、丙酮、16种食欲抑制剂（包括氯卡色林、麻黄碱、辛伐他汀、西曲布明等）的标准溶液。

实验样品为市售减肥保健食品。

1.2 实验参数优化

选择控制变量法，分析最佳实验参数（包括对比色谱柱、流动相、质谱条件、提取溶剂、净化柱），明确检测方法的应用要点。

在色谱柱分析中，选择迪马钻石一代C18柱、赛畅C18柱、沃特世XterraC18柱、沃特世CORTECS T3柱4种色谱柱，对比其对食欲抑制剂的分离效果，发现沃特世CORTECS T3柱的响应值最高，将其选为色谱柱。

在流动相分析中，A相的备选溶剂包括甲醇与乙腈;B相的备选溶剂包括水、乙酸铵溶液及磷酸溶液等，对比洗脱获得的色谱分离效果，发现A相为甲醇，B相为乙酸铵溶液时，色谱峰分离效果最佳，且表现出较高的离子丰度，将其选为流动相。

在质谱条件分析中，选择正离子与负离子两种模式，以同样参数进行扫描处理，设定相应质谱参数，对比两者响应强度与峰形，发现正离子模式下离子丰度更高，食欲抑制剂的离子化效率最高。就此，选择正离子扫描方式，合理设定雾化气压力、电压、流速等参数。

在提取溶剂分析中，选择甲醇、乙醇、丙酮及乙腈等溶剂为实验对象，分别设定不同溶剂组合，对食欲抑制剂进行提取处理，对比提取效果，发现甲醇和丙酮混合提取效果最佳，将其混合比设定为6∶4（体积比）。

在净化柱分析中，选择WCX、WAX、SIL及MCX等固相萃取柱，进行净化实验，测定混合液的净化回收率。结果显示，MCX的净化回收率最高，选定为净化柱。

1.3 样品处理

准确称取5 g减肥保健食品，置于50 mL离心管中，向离心管内添加

10 mL甲醇，在频率40 KHz的条件下，进行超声提取;将超声提取后的物质置于离心机中离心处理5 min，离心条件为12 000 rpm;吸取上清液，向残渣内添加10 mL甲醇，以同样参数进行超声提取，将其与上清液混合;混合液置于旋转蒸发仪中，将混合液浓缩至3 mL;通过混合型阳离子交换固相萃取柱（MCX）对浓缩液进行净化处理，处理剂选择丙酮、甲醇与水;净化后的混合液进行淋洗处理，处理剂选择盐酸与甲醇;使用甲醇-水-氨水混合液（三者体积比为80∶12∶8）洗脱，置于氮吹仪中干燥处理，处理后的残渣添加1 mL乙腈溶解，使用0.22 μm的膜过滤，完成样品处理。

1.4 实验条件

在色谱分析中，选择沃特世CORTECS T3型号的色谱柱，将柱温设定为30 ℃;进样量设定为10 μL;选择甲醇为A相，乙酸铵溶液为B相;各相的流速设定为1 mL/min;色谱柱选择梯度洗脱方式。

在质谱分析中，选择ESI源为离子源，采取ESI+扫描方式，全扫描参数设定为50～1 000 m/z;鞘气温度设定为400 ℃;干燥气温度设定为

300 ℃;流速设定为10 L/min;毛细管电压设定为4 000 V;雾化气压力设定为300 KPa，流速设定为1.5 L/min。

2 实验结果与分析

在检测的30种减肥保健食品中，1种检测出豪莫西布曲明，检测添加量为11.2 μg/L;1种检测出苯丙醇胺，检测添加量为6.3 μg/kg。两者均为非法添加非食用物质，会对人体造成

损害。

以不含食欲抑制剂的减肥保健食品为样品，对其进行前处理后，添加低浓度（1、5、10、50 ng/mL与100 ng/mL）的食欲抑制剂标准液，检测后计算检出限（信噪比设定为3）与定量限（信噪比设定为10）。检测结果显示，该方法的检出限为0.03～

0.3 μg/kg，定量限为0.1～1 μg/kg。同时，向不含食欲抑制剂的样品添加1、50、100 μg/kg的16种食欲抑制剂混合标准溶液，按照最佳实验条件进行检测，分析该检测方法的回收率与精密度。检测结果显示，在1～

100 μg/kg的添加范围内，该检测方法的加标回收率为92.3%～99.4%，相对标准偏差为1%～4%，说明该检测方法检测准确性与灵敏度高。

3 结论

综上所述，HPLC-ESI-QTOF-MS法在减肥保健食品中食欲抑制剂检测中，检出限为0.03～0.3 μg/kg，定量限为0.1～1 μg/kg，具有检测准确性高、检测灵敏度高等优势，可推广应用。检测过程中，检测人员需做好样品前处理，按照合理色谱条件与质谱条件检测，保障检测方法优势的发挥。