对《SF/Z JD0107025—2018》毛发中毒品分析的试验探讨与改进建议

2020-11-10吴君金刘遥廖述纯

科学与财富 2020年27期

吴君金刘遥廖述纯

摘要：毛发毒品分析在法庭毒品分析领域有其独特的优势，已得到了法庭的承认、采纳。随着技术规范《SF/Z JD0107025—2018》的应用，使毛发分析已成为毒品检测的常规操作。本文对该技术规范中的分析程序、分析结果进行了评判与论述，对毛发分析操作过程中的部分关键步骤进行了试验改进与理论探究，对样本处理方法进行了优化与补充，使方法精密度明显提高，为毛发中毒品定量分析提供了基础保证。

关键词：毛发;毒品分析;技术规范;添加样品;色谱峰

1前言

毛发中毒品分析相较其他生物检材，无论取材简便性与稳定性，还是吸毒信息量与长程性，比常见血液、尿液等生物检材具有独特优势[1]。我国对毛发中毒品分析研究蓬勃发展，随着系列技术规范、行业标准的实施与应用，近年来毛发中毒品分析已成为司法判定吸毒的重要信报，为我国当今禁毒工作提供了巨大便利与贡献[2]。

《毛发中15种毒品及代谢物的液相色谱- 串联质谱检验方法》（SF/Z JD0107025—2018）技术规范，为我国毛发中毒品分析广泛应用提供了重要技术支持。该规范的推出为现在吸毒判定与禁毒戒毒提供了法定证据。当然，因毛发结构的特殊性与毒品性质的差异性，该技术规范可能还需更进一步的补充，为使该法应用于毛发中毒品的定量分析，还需进一步完善，以提高方法的精密度。

本文在该技术规范的司法鉴定应用中，就发现的疑问进行了总结，并对部分重要步骤进行了实验补充，同时对理论依据进行了初步探讨;对部分步骤提出了改进与完善建议;使该方法更具科学性与适用性，提高了方法精密度，为毛中毒品定量分析提供了基础条件。

2《SF/Z JD0107025—2018》技術规范应用中的问题

2.1 11种毒品添加标准品的离子峰数据统计与分析

按标准规范要求，每次毛发样本检测时，需同时进行添加标准品与空白样品，以便对照分析。在仪器正常与参数不变的情况，对某月添加标准品离子峰数据随机统计，见表1与表2。

由表2可知，R/h比于0.48～1.38之间，RSD于15%～38%之间。数据表明，按技术规范对添加标准品测定，峰信号的再现性与精密度较差，按3δ原理[3]，现方法不能应用于定量分析，对定性分析的检出限LOD附近值的判定也会造成较大干扰。

2.2 再现性较差原因探究与试验

对毛发样品处理液进行重现性测定，以考察仪器的重现性与精密度，数据如表3。

由表3可知，对样品重复测定，△h/h于0%～10%之间，仪器测定重现性较好，仪器条件能满足毛发中毒品定性分析检出限LOD的判定，也具备痕量定量分析的仪器要求;表1峰值重现性较差的主要原因，不是因仪器精密度影响，而是由测定过程中的步骤影响造成的。

2.2 影响添加样品精密度原因初步探究

2.2.1 样品处理液上机测定前滤膜过滤的必要性

按技术规范对添加样品处理分析中，因为毛发粉末较细而轻，在分析过程的移取上清液步骤时，偶尔会带入毛发细粉末;同时，在吹干与复溶等过程中不可避免会偶有不易见的外来微小粒状物，这些小粒状物不仅影响仪器测定稳定性与使用寿命，还会对仪器关键部件造成致命的损伤。因此，对样品处理液上机前的滤膜过滤，是LC-MS/MS测定前的必要步骤，也是在相关国标、行标中多见采用的常规操作。综合所有因素，本文认为，应增加样品处理液上机前的滤膜过滤步骤。

2.2.2 样品精密度原因初步探究

结合《SF/Z JD0107025—2018》技术规范与实验室改进，添加样品处理步骤可分解为：

（1）取空白毛发样品20mg，准确添加100μL毒品混合标准液，使添加样品中毒品量与判断阳性的检出限值一致，加入900μL内标甲氧那明标准工作液，使浸出液总体积为1000μL，冰浴超声30min;（2）离心分离，移取上清液，于60℃水浴空气流下吹干;残留物用100？L甲醇复溶;（3）将复溶液过针式滤膜于进样瓶中。

步骤（1）的主要目的：内标主要是验证前处理过程和仪器可信性、可靠性;空白加标准品平行测定是便于排除未知样本分析过程中带来的过程中部分系统误差;冰浴超声是对毛发中毒品的浸出。从理论分析，步骤（1）对未知样本中毒品测定属关键环节，但对添加样品精密度影响较小，因为毒品在该实验步骤条件下基本不会分解或挥发，也不存在浸出率影响。

综上所述，影响添加样品峰值精密度的主要原因应在步骤（2）、步骤（3）的移取、吹干、复溶与过滤环节中。

3 影响添加样品精密度原因试验与讨论

3.1 滤膜选择与直接测对照试验

分别准确移取50μL毒品的混合标准溶液于系列离心管中，分别加50？L甲醇，涡旋混匀;方法1为直接置于进样瓶，方法2、3、4用不同材质过滤膜过滤，上机测定，数据及比较见表4。

由表4可知，用尼龙材膜过滤，色谱信号明显减弱，其中苯丙胺类、苯甲酰爱康宁、单乙酰吗啡非常明显;用PTFE材与PVDF材滤头过滤，峰高比在于0.92～1.09之间，峰信号无明显变化。尼龙膜对部分毒品吸附明显，PTFE材与PVDF滤头对上述毒品基本不吸附。

尼龙材膜对毒品的吸附机理，少见报导。本文认为，尼龙属酰胺类聚合物，从有机物的相似相溶相吸原理[4]，尼龙材膜可能对有胺基的苯胺类、有酰基的毒品吸附严重。因此，选用滤头时，绝不能选用最常用的尼龙膜材滤头，而选用PTFE材与PVDF材膜滤头均可。

3.2 氮气吹干条件与复溶的影响试验

按下列方法分别对空白添加样品进行处理。方法1：按技术规范，离心分离后，取上清液，直接滤膜过滤分析（注因未吹干，毒品浓度理论是方法2的1/10）;方法2同技术规范;方法3仅氮气吹干时不进行水浴加热，其它同技术规范。

由表5可知，在按技术规范进行移取、吹干、复溶、过滤测定，与直接测定比较，损失率达25%～88%;水浴热吹与常温冷吹基本一致，基本不减少待测毒品损失率。

关于毒品的挥发性少见报导，但常见的非甲烷烃类有机物、醇酮醚类有机物、含氯氮硫类有机物等，都属于挥发性有机物[5]。而上述毒品多数属于此类有机物，应归属于挥发性有机物;同时上述毒品中，阿片类毒品多见吸食，正因其挥发性;而苯丙胺类，主结构有苯基与胺基，且分子量相对较小，应也属较易挥发的机物。

对属具有一定挥发性的有机物，不应采用挥发易挥发的溶剂进行定量浓缩。本文认为：技术规范中的氮气吹干复溶，主要目的是浓缩与定容。因为氮气吹干过程中毒品损失率大，对定量分析影响较大，对定性分析也必有一定影响。本文建议取消该试验步骤，改为混匀离心后直接过濾测定。虽待测毒品浓度会有一定程度降低，但现行仪器的灵敏度多见较高，对规范中11种毒品的检出限量能满足要求。同时也可通过适当增加称样量、减少浸出液、增大进样量等方式提高检测响应值。

4 样品前处理改进总结

综述上述试验与结论，本人建议将技术规范中6.1.1与6.1.3进行修改完善，其它内容与条款不变，6.1.1与6.1.3修改为：

6.1.1案件样品

毛发样品依次用适量的水和丙酮振荡洗涤两次，晾干后剪成约1mm段，置冷冻研磨仪中粉碎，呈粉末状。

称取粉末20mg，加入1000μL内标甲氧那明标准工作液（甲氧那明1ng/mL），冰浴超声30min，取出，混匀，离心分离沉淀，用一次针头移取部分上清液，用PTFE材或PVDF材滤头过滤，滤液供仪器分析。

6.1.3添加样品

取空白毛发样品20mg，添加案件样品中出现的可疑目标物对照品标准物质工作液适量，补加内标甲氧那明标准工作液（甲氧那明1ng/mL），使加入液总体积为1000μL，余下同6.1.1，与案件样品平行提取操作。

5 改进前后精密度对照试验

使用改进前和改进后方法对添加样品进行精密度试验，结果见表6与表7。

试验表明，表6改进前的RSD在12%～25%，表7改进后RSD在4%～10%，精密度有明显提高;相应待测毒品峰信号明显增强。

6结论与展望

经过本文试验与探索，并对技术规范方法进行改进与完善，方法科学性更加严谨，可操作与适用性更强，测定精密度明显改善，为毛发中毒品的定量分析提供了基础条件。当然，对本规范应用于定量分析方面，案件样品的浸出方法与条件还有待进一步试验。