杨联伟 张莉

摘要：本文分析了2018～2019年北碚区禽流感外环境监测结果，介绍了本区禽流感病毒在外环境污染情况。结果表明：从活禽市场480分外环境标本中，检出甲型禽流感病毒核酸阳性297份，H9亚型核酸陽性180份，H7亚型核酸阳性0份，H5亚型核酸阳性60份，检出率分别为61.88%、37.5%、0.00%、12.50%。结论为北碚区城乡活禽市场外环境普遍存在禽流感病毒，潜在感染风险较高。

关键词：禽流感;活禽市场;AH9

人感染高致病性禽流感是由人类感染禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）所引起的人禽共患传染病，自1997年在香港发现人感染禽流感之后，此病症引起全世界卫生组织的高度关注。有文献报道，人感染禽流感主要是由于接触了感染病毒的禽鸟及其分泌物和排泄物。因此，禽类养殖、交易、宰杀等涉禽职业，以及涉禽环境都被认为是人感染禽流感病毒的危险因素。2017年重庆市部分区县发现人感染禽流感H7N9病例，按应急工作要求，参照《职业暴露人群血清学和环境高致病性禽流感监测方案》（2011版），2018～2019年对北碚区活禽市场外环境中禽流感病毒及其亚型进行监测，检测结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 标本采集

在北碚区城乡活禽市场采集三类外环境标本（禽粪、笼具擦拭子、案板擦拭子），所有标本操作过程（采集、处理、运输）严格按照《职业暴露人群血清学和环境高致病性禽流感监测方案》（2011版）进行。

1.2 标本检测

从采集的外环境标本中提取病毒RNA后，以实时荧光定量PCR法同时检测甲型禽流感病毒核酸及H5、H7、H9亚型，严格按试剂盒的操作说明进行体系配置、扩增和结果判定。

1.3 检测方法及仪器

主要病毒核酸检测试剂和仪器RNA提取试剂盒由江苏硕世和广州达安生物科技股份有限公司生产。主要检测仪器设备为杭州安杰思AFD4800实时荧光定量PCR仪、低温高速离心机、旋涡混合器、二级生物安全柜等。

1.4 统计学处理

监测数据录入Excel 2007进行整理，用SPSS17.0统计软件进行X2检验，α=0.05，以Р<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 活禽场所外环境监测结果

2018～2019年共采集并检测三类外环境标本480份。检出甲型通用病毒核酸阳性标本297份，阳性率61.88%。其中H7亚型病毒核酸阳性0份，阳性率为0.00%;H5亚型病毒核酸阳性60份，阳性率为12.50%;H9亚型病毒核酸阳性180份，阳性率为37.50%。

2.2 不同监测场所禽流感病毒检出率

城区活禽场所禽流感病毒阳性率略高于乡镇活禽场所，无显著差异（X2=0.073，P>0.05）;城区活禽场所禽流感病毒H5亚型阳性率略高于乡镇，无显著差异（X2=2.13，P>0.05）;城乡活禽场所禽流感病毒H7亚型阳性率均为0.00%，无统计学意义;城区活禽场所禽流感病毒H9亚型阳性率略高于乡镇，无显著差异（X2=2.00，P>0.05）。见表1。

2.3 不同类型标本禽流感病毒核酸检测结果

从3种不同类型标本中均检出禽流感病毒H5、H9亚型，检出率从高至低分别为，案板擦拭子>禽类笼具>禽类粪便。三类外环境标本中禽流感病毒FluA检出率有显著差异（X2=7.34，P<0.05）， 有统计学意义;三类外环境标本中AH5检出率有显著差异（X2=38.00，P<0.05），有统计学意义;三类外环境AH9检出率无显著差异（X2=1.732，P>0.05）。见表2。

2.4 不同年份外环境标本中禽流感病毒检测结果

2018年外环境标本中禽流感病毒FluA、AH5、AH9检出率均高于2019年，2018～2019年均未检出AH7。2018～2019年外环境标本中禽流感病毒AH5亚型检出率无显著差异（X2=0.615，P>0.05）;2018～2019年外环境标本中禽流感病毒AH9亚型检出率无显著差异（X2=0.12，P>0.05）。见表3。

3 讨论

北碚区从2017年9月起开展了外环境禽流感病毒的监测工作，主要采用实时荧光定量PCR的方法进行禽流感病毒病原学检测，该方法具有灵敏度高、特异性强、速度快等优点。从2018～2019年北碚区禽流感外环境标本监测结果分析看，A型禽流感病毒检出率61.88%，表明近年来北碚区活禽场所外环境中禽流感病毒普遍存在，与相关报道基本一致，其H5、H9亚型均检出，其中H9亚型检出率最高（37.50%）。

不同监测场所的检测结果表明，北碚城区及乡镇活禽市场中普遍存在致病性禽流感病毒H5、H9亚型，与国内研究符合，活禽交易市场同时存在多种禽流感病毒污染的现象。

不同类型标本的检测结果表明，北碚区禽流感外环境标本病毒检出率依次是，案板擦拭子>禽类笼具>禽类粪便。表明在禽类的售卖、加工等环节中很容易造成污染，特别是宰杀中所用的案板等更容易受到禽流感病毒的污染。需提醒相关部门加强涉职人员的消毒防护意识，及时清理禽粪、清洁笼具及宰杀用具等，减少外环境中禽流感病毒的存在，降低人感染禽流感的风险。

人感染禽流感病毒的主要传播途径是呼吸道传播。建议：①长期坚持对涉禽场所禽流感监测，增加外环境标本类型，了解掌握本区禽流感病原的变化趋势，预判潜在感染风险，及时有效采取针对性的防控措施。②改进本区活禽市场卫生条件，切实加强对禽粪、笼具、宰杀用具、污水等清理消毒，增强对活禽场所涉职人员的安全防护意识，做好个人防护。③加大卫生宣教力度，进街道社区做好科学宣传工作，定期发布疫病防治知识，提高群众卫生及防护意识，避免接触活禽，减少受感染机会。

作者简介：杨联伟（1977-），男，主管技师，大学专科。研究方向：传防病检验。