王娅 刘璐璐 张中兴

（1 东莞台心医院药剂科 广东 东莞 523800）

（2 东莞台心医院神经内科 广东 东莞 523800）

脑梗死是临床上较为常见的卒中类型，占我国脑卒中的69.6%～70.8%。数据调查结果表明[1]：我国缺血性脑卒中年复发率为17.7%，影响患者健康、生活。目前，临床上对于脑梗死治疗多以改善脑血循环（包括：静脉溶栓、抗血小板、扩容及降纤等）、他汀及神经保护为主。阿司匹林联合氯吡格雷抗血小板治疗脑梗死具有良好的预防效果[2]。临床研究表明[3]：对于具有高危复发风险/伴有颅内动脉狭窄的脑梗死患者，与阿司匹林单药治疗相比，联合氯吡格雷能降低1 年内卒中复发率，亦可减少微栓子数量、出血风险。细胞色素P450（CYP450）是存在于肝脏中的由一系列结构与功能相关的酶组成的超家族，是药物在体内代谢的主要酶系[4]。CYP2C19 是CYP450 家族中较为重要的药物代谢酶，是影响氯吡格雷、奥美拉唑、普萘洛尔等药物代谢的重要原因；而基因多态性则是引起同一药物不同个体药效不同的重要原因之一。因此，本研究以脑梗死患者为对象，探讨东莞地区脑梗死患者CYP2C19 相关基因多态性分布及治疗指导价值，报道如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选择2019 年6 月—2020 年3 月脑梗死患者100 例作为对象，所有患者均为东莞籍贯，男63 例，女37 例，年龄（43 ～79）岁，平均（54.59±5.73）岁；NIHSS 评分（8 ～13）分，平均（11.21±2.18）分；疾病史：高血压48 例，高血脂26 例，糖尿病15 例，心房颤动11 例。纳入标准：①均符合脑梗死诊断标准[5]，且患者均为急性起病；②均为局灶神经功能缺损（一侧面部或肢体无力或麻木，语言障碍等），少数为全面神经功能缺损；③影像学出现责任病灶或症状/体征持续24h 以上；排除标准：①合并精神异常、血液系统疾病或TIA 者；②白细胞计数低于0.3×109/L、自身免疫系统疾病或器质性疾病者；③非血管性病因或伴有脑出血者。

1.2 方法

（1）仪器与设备。多通道荧光定量分析仪-Fascan 48S、双通道荧光检测仪内置分析软件（西安天隆科技有限公司）；高速/低速离心机（安徽中科中佳科学仪器有限公司）：HC-1016、旋涡混合仪（上海生工微型）；100 ～1000μL、10～100μL、1 ～2.5μL 规格移液枪；特异位点地高辛染色液（济南广音医疗科技有限公司）；CQ-WBC 型萃取液；BC-WBC 保存液。（2）检测方法。所有患者入院后采集外周静脉血2mL，放入EDTA 抗凝管中，并进行编号（与离心管编号保持一致，并发生混淆）；采用100 ～1000uL 移液器取CQ-WBC 型萃取液1000uL，放入离心管中；采用一次性医用巴氏吸管取血样300～500uL，并加入另一支新的离心管中（做好标记）；采用10～100uL 移液器吸取血样标本100uL，并放入离心管中，充分混合均匀后10min 静置，40s 以上离心，速度5000rpm，取出红色上液（留白色富集团）；向获得的沉淀物中加入100uL BC-WBC 保存液，放混匀仪中充分振荡使得白细胞富集团完全分解。取室温下取试剂1 ～3min 复溶，15s 以上离心，并标本，加入1.5uL 标本完成15 ～20s 离心，经变性、退火复性过程，特异性双Z 型探针和DNA 单链完成原位杂交，目标探针杂交目的基因位点，定位探针杂交邻近基因位点。双Z 探针杂交后，立体型荧光放大系统才会发光并被捕捉，经曲线分析后解读基因型，并完成CYP2C19*3、CYP2C19*2、CYP2C19*17 三个位点等位基因分布，并根据测定结果指导氯吡格雷治疗[6]。

1.3 统计学分析

数据采用SPSS18.0统计学软件分析处理，计数资料采用率（%）表示，行χ2检验，计量资料用均数±标准差（）表示，行t检验，P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2.结果

东莞地区脑梗死患者CYP2C19 相关基因多态性分布较广，CYP2C19*3 基因型中以GG 为主，占93.00%；CYP2C19*2 基因型中以GG 和GA 为主，分别占：53.50%和43.50%；CYP2C19*17 基因型中以CC 为主，占97.00%，见表1。

表1 东莞地区脑梗死患者CYP2C19 相关基因多态性分布

3.讨论

氯吡格雷是脑梗死患者中常用的治疗药物，而CYP2C19酶是氯吡格雷体内代谢过程中较为重要的生物酶，患者用药后药物经C Y450 酶代谢转化为活性代谢产物，并通过二硫健不可逆连接到血小板表面的二磷酸腺苷（A D P）受体P2Y12 上，从而抑制APD 受体依赖性血小板GPIIb/IIIa 复合物的形成，抑制血小板聚集。临床研究表明[7]：CYP2C19相关基因多态性的存在与该酶活性存在紧密的联系。国外学者研究表明：CYP2C19、ABCBI、PONI 等基因多态性中，C Y P2C19 基因多态性最为明显，是影响氯吡格雷抵抗的重要遗传因素。影响氯吡格雷代谢的C Y P2C19 相关基因多态性的位点主要有*2、*3、*17。临床上，根据携带CYP2C19各位点基因型的不同，将氯吡格雷的代谢分为快代谢型、正常代谢型、慢代谢型及中代谢型四种不同的类型。2010年美国F D A 对氯吡格雷说明书进行修改，建议脑梗死患者治疗前检测C Y P2C19 基因多态性，并根据测定结果调整治疗方案；对于C Y P2C19 基因多态性呈慢代谢型患者，则应考虑调整治疗方案，降低心脑血管疾病发生率，促进患者早期恢复[8]。本研究中，东莞地区脑梗死患者C Y P2C19 相关基因多态性分布较广，C Y P2C19*3 基因型中以G G 为主，占93.00%；CYP2C19*2 基因型中以GG 和GA 为主，分别占：54.00% 和43.00%；C Y P2C19*17 基因型中以C C 为主，占97.00%，说明东莞地区脑梗死患者C Y P2C19 相关基因多态性较为普遍，能影响患者血小板聚集治疗效果。

综上所述，加强东莞地区脑梗死患者C Y P2C19 相关基因多态性分布测定能确定其遗传特性，亦可评估氯吡格雷治疗抵抗风险，能为患者个体化方案治疗提供参考。