林霄月，宋高臣

(1.黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040；2.牡丹江医学院，黑龙江 牡丹江 157011)

黄芪为豆科植物，味甘，性温，归脾、肺经，具有补气、升阳、固表、止汗、利水、消肿、敛疮生肌和托毒排脓等功效[1]。目前，以黄芪为原料药生产的中成药多达200余种，是临床应用最为广泛的补益中药。现代药理研究发现黄芪多糖具有免疫调节及抗肿瘤作用[2]。

肝癌是我国发病率较高的恶性肿瘤之一[3]，其治疗手段以化疗为主。由于肿瘤细胞起源于正常细胞，化疗药物对肿瘤细胞和正常细胞的选择性低，在杀伤恶性肿瘤细胞的同时，对某些正常组织也产生了一定程度的损害，在治疗中产生严重不良反应。本实验通过注射液黄芪多糖对HepG2荷瘤小鼠化疗过程中Ki-67抗原、缺氧诱导因子(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达，对增效减毒作用进行研究。

一、材料与方法

1 实验材料

1.1 实验动物与瘤株

BALB/C裸小鼠，6-8周龄，雌雄各半，符合健康三级动物(实验动物生产许可证:SCXK【黑】2018-16)。购自哈尔滨医科大学附属第二医院实验动物中心。HepG2细胞株，购自黑龙江省肿瘤研究所。

1.2 实验试剂与仪器

注射液黄芪多糖，购自美国泛华医药公司。蛋白酶抑制剂cocktail购自美国罗氏公司。RIPA裂解液(强)购自索莱宝科技有限公司(北京)。VEGF免疫组化试剂盒，由北京中山生物有限公司提供。ki-67免疫组化试剂盒，由北京中山生物有限公司提供。HIF-1α免疫组化试剂盒，由北京中山生物有限公司提供。

2 实验方法

2.1 实验动物造模与分组

将常规饲养的63只裸鼠随机抽取56只作为荷瘤对象，另7只作为正常组。……