赵凯 林大钧 卢俊 于瑞国 黄梓辉

1.广东省公安厅刑事技术中心2.广东省湛江市公安局

3.中国科学院广州生物医药与健康研究院4.高盛生物技术股份有限公司

引言

得益于容易实现自动化提取的优势，磁珠法作为目前主流的核酸DNA提取手段，在法医鉴定领域得到了非常广泛的应用。但在此趋势下，不易实现自动化的硅珠法仍然没有被市场淘汰，就是因为硅珠法具有磁珠法所不具备的优势。与磁珠相比，硅珠法提取在灵敏度方面并没有明显差异，而且硅珠法提取所得的产物更为纯净，适用于法医上的疑难检材提取，如陈旧骨骼、腐败组织等[1,2]。由于法医检材的复杂性以及特殊性，在提取过程中会存在各种抑制物，如泥土、灰尘、油污等，大大增加了提取的难度。因此，核酸提取方法的抗抑制能力在法医领域尤其重要。为验证硅珠法提取DNA的灵敏度，并且探究该方法的抗抑制能力，本文设计方案，模拟法医样品进行测试，以期正确评价硅珠提取法的灵敏度及抗抑制性能。

一、材料与方法

（一）材料

实验所用标准DNA为ABI公司VeriFilerTMPlus PCR扩增试剂盒中自带的007标准DNA，浓度为100pg/ul；血液样本用EDTA抗凝管采集混匀后分装，-20℃冻存，使用前随机取3管分装的血液混合，充分混匀后用无菌超纯水稀释1000倍待用；硅珠提取以及磁珠提取分别采用一款常见市售试剂盒；提取产物的扩增使用VeriFilerTMPlus PCR试剂盒，并采用ABI公司Veriti 96 Well Fast Thermal Cycler型号扩增仪；电泳分析采用ABI公司3500型号测序仪。

（二）样品处理

标准DNA混匀后直接吸取相应体积，添加至离心管上层套管待用；……