戴晓玥，吴亮，夏雯，阴晴，邹治情，周亚玲，何蕾，丁龙坤，席月，张有江，许化溪

(1. 江苏大学医学院，江苏 镇江 212013； 2. 江苏大学附属医院检验科，江苏 镇江 212001； 3. 扬州市广陵区疾病预防控中心，江苏 扬州 225001)

鲍曼不动杆菌(Acinetobacterbaumannii)是引起呼吸机相关性肺炎(ventilator-associated pneumonia, VAP)的主要病原菌[1]，患者上呼吸道黏膜表面定植的鲍曼不动杆菌是VAP的重要来源[2]。目前已知的鲍曼不动杆菌毒力因子包括外膜蛋白(outer membrane protein, Omp)，磷脂酶D和外膜囊泡等，其中OmpA是外膜蛋白中表达量最高的一种，参与鲍曼不动杆菌外膜囊泡组装以及细菌黏附和侵入等过程[3]。近来研究发现，OmpA也存在于鲍曼不动杆菌外膜囊泡中，通过外膜囊泡携带传递至远处发挥致病作用，同时破坏宿主细胞线粒体完整性，诱发细胞凋亡[4]或坏死[5]，与鲍曼不动杆菌诱发的VAP严重程度密切相关。鲍曼不动杆菌野生株诱导人喉表皮样癌Hep-2细胞凋亡能力显著强于OmpA基因敲除株，且OmpA基因敲除株明显丧失对宿主肺泡上皮细胞的黏附能力[6]。研究发现[7]，将OmpA基因转染HeLa细胞后可诱发细胞自噬。携带OmpA基因的慢病毒转染RAW 264.7细胞48 h后可引起细胞含NLR家族Pyrin域NOD样受体家族3(NLRP3)炎症小体激活和炎症因子表达上调[8]。此外，OmpA靶向作用于线粒体并诱导产生活性氧，诱发树突状细胞凋亡和坏死[6]，但OmpA毒力蛋白的确切致病机制目前仍不清楚。因此，本研究采用原核表达技术制备重组OmpA蛋白[9]，通过免疫新西兰兔制备多克隆抗体，建立鲍曼不动杆菌OmpA毒力蛋白的快速检测方法；同时研究OmpA对THP-1细胞自噬与凋亡的影响。……