赵兰静，潘 杰，吴 茵

华东疗养院检验科，江苏无锡 214065

2018年世界卫生组织(WHO)报告显示，宫颈癌的发病率和病死率均位居全球女性癌症的第4位，严重威胁着女性的生命健康。宫颈癌是可以通过疫苗接种、早期筛查等措施有效预防的恶性肿瘤。目前疫苗已作为预防宫颈癌及癌前病变的首选，然而疫苗的接种效果与人乳头瘤病毒(HPV)感染的流行程度及型别分布有着重要关系[1]。本文通过对上海地区健康体检人群的宫颈脱落细胞进行HPV分型检测，以期了解上海地区HPV型别分布情况和特征，为宫颈癌防治和疫苗的研发提供流行病学依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2017年8月至2019年10月来华东疗养院体检的上海地区女性的宫颈脱落细胞标本14 394份，受试者年龄21～87岁，中位年龄46岁。以来院体检人群的年龄分布特点为分组依据，分成5组：≤35、>35～45、>45～55、>55～65、>65岁组。

1.2仪器与试剂 Micromax微量离心机(美国Thermo公司)，Bioer MB-102振荡恒温金属浴(杭州博日公司)，ABI VERITI梯度PCR仪(美国Life公司)，超级恒温循环槽(上海一恒科学仪器有限公司)，BYN-H16杂交仪(深圳亚能生物技术有限公司)。HPV基因分型(23型)检测试剂盒(深圳亚能生物技术有限公司)。

1.3方法

1.3.1标本采集 妇产科医生以窥阴器暴露宫颈，将宫颈刷置于宫颈口，单方向旋转4～5周，将宫颈刷放入对应编号的专用细胞保存管中，将刷柄折断，拧紧瓶盖，及时送检。4 ℃保存待用，至检测时不超过2 d。

1.3.2HPV分型检测 采用亚能PCR-反向斑点杂交技术(PCR-RDB)对宫颈脱落细胞进行23型HPV基因分型的检测，包括17种高危型(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82)和6种低危型(HPV6、11、42、43、81、83)。所有操作过程严格按照HPV基因分型(23型)检测试剂盒产品说明书进行。

1.4统计学处理 采用EXCEL2000建立数据库并进行初步分析。采用SPSS11.0统计软件进行数据分析。计数资料以频数或百分率表示，各组阳性率的比较采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1各年龄段女性HPV阳性率情况 本研究中，HPV阳性共2 368份，阳性率为16.45%。各年龄组中HPV的阳性率比较，差异均有统计学意义(χ2=143.41，P<0.05)。>55岁的围经期女性HPV的阳性率随着年龄的增长而明显升高，其中>65岁组阳性率最高(27.05%)。见表1。

表1 14 394例女性HPV阳性率与年龄分布的关系

2.2HPV多重感染的情况 2 368份HPV阳性标本中，单一感染为1 808份，感染率为76.35%；多重感染共560份，感染率为23.65%。在多重感染中以双重感染(16.64%)为主，最多可合并6重感染。

2.3HPV型别分布 高危型HPV感染率排在前5位的分别是HPV52(3.68%)、HPV53型(2.01%)、HPV58型(1.90%)、HPV68型(1.45%)、HPV16型(1.39%)，其他高危型的感染率从高到低依次为HPV56、66、33、39、31、59、18、35、45、82、73型。低危型HPV感染率最高的是HPV81型(1.92%)，其他低危型HPV的感染率从高到低依次为HPV42、43、6、83、11型。感染率最低的型别是HPV73型。其中HPV43、66、39、18型以多重感染为主，其他型别(特别是HPV83型)以单一感染为主。见表2、3。

表2 14 394例上海体检女性中高危型HPV型别分布情况

表3 14 394例上海体检女性中低危型HPV型别分布情况

3 讨 论

HPV是一种易感染人表皮和黏膜鳞状上皮细胞的双链DNA病毒，持续的HPV感染是宫颈癌发生的必要非充分条件[2]。然而，与生殖道感染相关的HPV分型有40余种，且在不同地区的人群中HPV感染存在明显的地域性差异。

本研究结果显示，上海地区健康体检女性中HPV的阳性率为16.45%。这一结果和冯晓春等[3]报道的上海市普陀区HPV阳性率(15.7%)相近，但明显高于深圳市龙岗区HPV的阳性率(6.92%)[4]，低于李江燕等[5]报道的上海地区HPV阳性率(28.6%)及通辽地区蒙古族女性HPV的阳性率(36.98%)[6]。张东红等[7]研究发现，HPV16型是我国最常见的感染型别，其他常见的型别依次为HPV58、18、52、33型。周小会等[8]研究表明，HPV16、52、58、53、33型是上海地区的优势型别。而本研究中排在前5位的高危型别依次为HPV52、53、58、68和16型，最常见的低危型别是HPV81型。这一结果进一步说明了HPV型别分布具有显著的人群特点和地域差异。另外，有研究认为随着年龄的增长，会伴随HPV16型和HPV52型作为优势型别的转变[9-10]。

有关HPV感染与年龄的相关性，文献报道的结果不尽相同。李晨等[11]发现≤25岁和50～59岁年龄组HPV阳性率较高，呈双峰分布。CAO等[12]研究表明，50岁以上的女性HPV阳性率最高(34.54%)，呈单峰分布。本研究结果显示，从>55～65岁年龄组开始，HPV的阳性率随着年龄增长呈现上升趋势，因此上海地区高龄女性是HPV感染的重点筛查对象。本研究结果与部分研究结果一致[13]。分析原因可能是：一方面是由于年轻女性自我保护意识增强，自身免疫力提高，而大龄女性由于卵巢功能下降，激素水平改变，清除既往感染和新发感染的能力减弱；另一方面可能与本研究中人群的选择性偏倚有关。

本研究结果显示，HPV多重感染率达23.65%，最多可合并6重感染。有关HPV多重感染是否增加致癌风险的说法尚存争议。章涛等[14]研究发现，HPV多重感染率随着宫颈病变程度加重呈增加趋势,提示宫颈癌与HPV多重感染密切相关。刘宗花等[15]认为，高危型HPV多重感染可增加宫颈上皮内病变的风险，但与宫颈癌的发生无明显相关性。也有研究认为，随着宫颈病变级别增加，HPV单一感染率与多重感染率差异并无统计学意义(P>0.05)[16]。因此对HPV多重感染与宫颈病变的关系及其发生机制，仍需结合病理学资料及其病因学机制进行深入研究。

现有的多价疫苗所针对的HPV型别与上海地区HPV感染的主要型别有所差异，需研制出适合上海地区的多价疫苗来更有效地预防宫颈病变的发生。另外，要继续加强对高龄女性HPV感染的定期随访，探索适合我国不同经济水平地区的HPV相关疾病预防方法，从而最大限度地降低宫颈病变的发生与发展。