严 礼，宋 晟，张继红，唐小兰，张海韵，郭焜鹏

(食品安全监测与预警湖南省重点实验室，湖南省食品质量监督检验研究院，长沙410117)

非洲猪瘟（African swine fever，ASF）是由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）引起的一种猪的急性、出血性传染病，因其严重危害养猪业，且无有效的疫苗防治，世界动物卫生组织（Office Inter-national des Epizooties，OIE）将其列为法定上报传染病。我国将其列为一类传染病，在国务院办公厅印发的《国家中长期动物疫病防治规划（2012－2020年）》中，非洲猪瘟是作为13种重点防范的外来动物疫病之一[1-4]。非洲猪瘟于2007年4月在格鲁吉亚爆发，同年11月，俄罗斯发生首例非洲猪瘟，并逐渐蔓延至俄罗斯远东地区。2018年非洲猪瘟在我国蔓延，严重威胁我国养猪业的发展，个别省份发生大规模的生猪减产，并存在非洲猪瘟病死猪肉流入市场的风险。因此，建立一种特异性强、灵敏度高、重复性好的病毒检验方法迫在眉睫[5-9]。

微滴数字 PCR（droplet digital PCR，ddPCR）是近几年出现的新一代聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）技术。利用油包水技术将反应液分割为数万个纳米级大小的微滴，每一个微滴都是一个独立的PCR反应体系，当PCR扩增完成后，利用微滴分析仪逐个对每个微滴进行检测，再根据统计学中的泊松分布原理分析阳性微滴的个数与比例，即可得出靶分子的起始拷贝数或浓度，从而实现对低至单个拷贝核酸分子的绝对定量。与传统实时荧光定量 PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）方法相比，它不依赖于标准曲线，因而定量结果更为精确，同时也使体系受反应抑制因子的影响大大降低[10-17]。

本研究根……