杨 娟，唐燕君，李文东，李红军，康 帅

视网膜母细胞瘤恶性程度较高，易发生转移，该病好发于婴幼儿，对其健康构成极大威胁[1-2]，故早期有效治疗很重要。蛇床子素是植物蛇床的果实。《本草纲目》和《别录》中相关记载显示，蛇床子味辛、苦，性温，入肾、脾经，可温肾助阳、祛风、燥湿、杀虫，治疗男子阳痿、阴囊湿痒、女子带下阴痒、子宫寒冷不孕、风湿痹痛、疥癣湿疮等症[1]。现代药理研究认为，蛇床子具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种功效[1]；其抗肿瘤作用在近年来受到越来越多的关注。动物实验研究显示，蛇床子素可抑制鼠肝癌、乳腺癌转移等[2-3]；但目前关于其抗视网膜母细胞瘤的研究尚不多见，本研究采用Y79细胞建立视网膜母细胞瘤裸鼠玻璃体腔移植瘤模型，从分子层面分析了蛇床子素通过抑制PI3K/AKT/mTOR的活化，诱导视网膜母细胞瘤Y79细胞凋亡和抑制裸鼠成瘤的作用。

1 材料与方法

1.1实验材料

1.1.1实验动物和药物：选取出生24 h内BALB/C-nu/nu雄性裸鼠60只，体重(1.51±0.16)g，购自凯学生物科技(上海)有限公司，饲养于SPF级动物房，室温24℃，湿度60%。蛇床子素(西安应化生物技术有限公司，20 mg/支)用生理盐水将其配成浓度为8、16、32 μmol/L，4℃冰箱保存备用。

1.1.2瘤株：RB-Y79细胞株购自研域生育技术(上海)有限公司，培养于含10%胎牛血清(上海江林生物科技有限公司)的RPMI 1604培养基(上海金畔生物科技有限公司)中，置于37℃、湿度95%、含5%CO2的培养箱中静置培养并进行传代。

1.1.3实验试剂：半胱天冬酶-3(Caspase-3)， Caspase-9活性检测试剂盒、反转录PCR(RT-PCR)试剂盒、磷脂酰丝氨酸结合蛋白-异硫氢酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)细胞凋亡检测试剂盒均购自上海沪震生物科技有限公司；……