黄连素对阿尔兹海默症大鼠Th17、Treg亚群比例及脑组织炎性细胞因子的影响

2020-08-27周晶董笑克马青科金香兰张志辰

环球中医药 2020年8期

周晶董笑克马青科金香兰张志辰

阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease，AD)患者标志性病理改变为神经斑块和神经纤维缠结的产生，主要由β淀粉样肽(beta-amyloid，Aβ)沉积和磷酸化的微管蛋白Tau(p-Tau)组成，这些病理改变周围往往存在过表达的炎性细胞因子，抗炎治疗可延迟AD的进展，因此，认为AD病理损伤主要与脑内炎性反应有关。黄连素是中药黄连的主要有效成分之一，具有显著的抗炎作用，团队研究发现150 mg/kg黄连素能显著降低AD模型大鼠p-Tau表达，并改善大鼠认知及记忆功能[1]，其作用机制是否与改善外周辅助性T细胞(T helper cell，Th)细胞比例，进而减轻脑组织炎性水平相关，目前尚无报道。本研究旨在探究黄连素对AD模型大鼠外周血Th17及调节性T细胞(regulatory T-cell，Treg)细胞比例的调节作用，及其对大鼠脑海马组织炎症细胞因子表达的影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物

SPF级雄性Wistar大鼠36只，6周龄，体重220±20 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证编号：SYXK(京)：2019-0013。饲养于北京中医药大学东方医院动物中心，饲养级别为SPF级，5只/笼，保证正常光照节律、温度适度、环境安静，正常大鼠生长繁殖饲料饲养，自由进食和饮水。

1.2 药物及试剂

盐酸小檗碱(成都锦华药业有限公司，批号：180613)；Aβ25-35(美国Sigma公司，批号：053M4804V)，注射前用生理盐水将Aβ25-35配制为10 μg/μL的溶液，在37℃孵育1周。大鼠抗CD3 APC(Ebioscience，货号：17-0030-82)、CD4 FITC(Ebioscience，货号：11-0040-82)、CD8 PerCP(Ebioscience，货号：46-0084-82)、CD25 APC(Ebioscience，货号：17-0390-82)、FoxP3 PE(Ebioscience，货号：12-4774-42)、IL-17A PE(Ebioscience，货号：12-7177-81)。