许小婷，汪 月，王 琳，曾宪卓

随着世界人口日趋老龄化，癌症正在成为引起人类非正常死亡的最重要原因，目前在全球每年有大约1 000万人死于各种癌症[1]。传统的治疗癌症手段如放疗、化疗和手术治疗等已逐渐进入平台期。近年来，肿瘤免疫疗法研究取得了重要进展，肿瘤免疫细胞治疗受到越来越多的关注，预示着免疫细胞治疗有望成为继手术、化疗、放疗、靶向治疗后恶性肿瘤治疗领域的又一场革新[2]。基于免疫细胞的临床应用越来越广泛，如何有效的大规模培养免疫细胞也显得尤为重要。但目前大多数的免疫细胞培养都是采用传统的实验室培养瓶培养法，具有无法实现单次培养单元满足一个患者的细胞使用量、占地面积大、无法监控导致细胞培养批次产生显著差异、培养周期长、劳动强度大及人力成本高等缺陷。与传统的实验室培养瓶培养相比，使用生物反应器的细胞培养具有自动化、全程条件可控、动态培养可以提供一个更加稳定和均匀的培养环境和具有大规模工业化潜力的优点，可以从根本上解决传统细胞培养数量少、稳定性差、易污染、工作量大及周期长等问题[3]。本研究选用旋转式生物反应器(rotating wall-vessel bioreactor,RWV)培养细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer，CIK)细胞，与传统的实验室培养瓶培养法进行比较，验证各培养组CIK细胞的增殖能力、细胞因子分泌情况及肿瘤杀伤活力。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样本采集 8名男性健康成年人志愿者外周血标本，50 mL/份，EDTA抗凝，无菌采集。……