闵思源 陈柏楠 陈康 杨妍 曾祥玲

摘 要 木本植物的稳定遗传转化难以建立或所需时间长，而在这些木本植物中建立瞬时遗传转化可大大提高基因功能分析的效率。因此，使用根癌农杆菌介导的瞬时侵染技术，以桂花和石楠叶片为材料，以β-葡糖醛酸酶基因（β-glucuronidase，GUS）作为实验结果检测的报告基因，建立瞬时表达体系。结果发现，侵染过程中，农杆菌对于桂花和石楠叶片有一定的毒性，可加速叶片衰败;蔗糖溶液相对于水可减缓叶片衰败;GUS基因表达的蛋白质可能因为叶片木质化程度太高或叶片脱色后褐化而无法检测或者没有表达。本实验为进一步改进桂花和石楠的瞬时表达实验体系提供了借鉴。

关键词 桂花;石楠;瞬时表达;遗传转化

桂花是我国的十大传统名花之一，自古享有“独占三秋压众芳”的美誉。随着大量基因测序工作的完成，我国对于植物基因作用的研究也进入了更加深入的阶段。目前，对植物基因功能与作用的研究主要通过转基因技术、基因敲除、基因沉默等方法。瞬时表达是最近几十年来发展的一种高速、高效率的检测蛋白质表达的办法，随着相关研究不断深入，逐渐被广泛应用到生物科学各方面的发展研究中。植物基因瞬时表达体系的构建为简洁、快速研究启动子活性、基因功能和蛋白质定位等开辟了新的途径[1-3]。园林木本植物中的瞬时表达是基因功能检测鉴定的有效方法，相较于稳定的遗传转化系……