冯明祥，图 雅，徐 雨，韦登雄，刘 苹，陈 颖，杨和俊

(贵州省关岭布依族苗族自治县动物疫病预防控制中心，贵州关岭561300)

关岭牛是国家级重点保护的78个地方畜禽品种之一，以出肉率高、蛋白质含量高、繁殖率高、脂肪含量低等特点而闻名[1]。关岭牛产业是关岭自治县近年来的重点发展产业。牛血液原虫，如附红细胞体(Eperythrozoon)、泰勒虫(Theileria)、巴贝斯虫(Babesia)、伊氏锥虫(Trypanosoma)等感染可导致间歇热、贫血、消瘦、黄疸、血红蛋白尿、水肿及神经症状，甚至死亡，严重阻碍养牛产业的健康发展[2～5]。形态学诊断法是传统的血液原虫诊断方法之一[2，6]，但需要鉴定人员具有很好的寄生虫形态学知识及相应的鉴定经验，并且无法鉴定寄生虫亚种。

近年来兴起的分子生物学诊断方法不仅可以鉴定虫种，还能用于寄生虫的流行病学调查。泰勒虫表面主要蛋白(MPSP)是主要的免疫显性蛋白，在寄生虫进入宿主红细胞阶段，该蛋白在寄生虫表面合成[7]。由于MPSP基因序列具有显著的种属差异，已广泛用于泰勒虫的亚种鉴定[5，8]。关岭牛易受蜱虫叮咬而感染血液原虫[9]。本试验通过分子生物学方法对关岭牛瑟氏泰勒虫进行检测，并统计不同季节的感染率和流行规律，为有效防控该病提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血液样品采集关岭自治县12个乡镇规模养牛场的关岭牛血液样品262份(夏季157份，冬季105份)作为检测血样。

1.1.2 主要试剂2×TaqMaster Mix试剂，购自康为世纪生物科技有限公司；DNA Marker DL 2 000(TaKaRa)、GoldView核酸染料(Solarbio)、天根DP318-02血液基因组DNA提取试剂盒，均购自北京诺博莱德科技有限公司。……