（深圳市计量质量检测研究院，深圳市，518000） 钟 杰

2015 版《化妆品安全技术规范》要求对于微生物检测主要是细菌总数与霉菌和酵母菌总数，在总数控制于标准以下的前提下,不得检测出耐热大肠菌群、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌。

医用敷料和药妆因其成分简单，标准严格得到了越来越多人的信赖。化妆品被致病菌污染后，不但会影响到产品的良好品牌形象，对公司的经济造成致命性打击，同时还会对客户的身体造成严重的危害。所以，不管是哪个国家，对于化妆品的质量安全，都非常的关注，世界上各个国家或者地区都推行了属于自己国家的化妆品微生物含量标准，对微生物的含量进行了明确的规定，这样就能够最大程度减少微生物产生的病毒对化妆品产生的污染现象，不但能够提升其质量安全，同时还能够保护消费者的身体健康。

1 致病菌与化妆品关系

1.1 微生物基本特征

微生物体积微小基本肉眼不可见，不过种类非常多元化，并且分布的区域比较宽泛，当处于比较合适的环境当中，就会开始迅速的繁殖。微生物并不是全部都是坏的，也有好的，不过一些致病菌会危害人体的健康。

1.2 两者关系

化妆品每增加一个功能，它的原料成分就也会增加，原料环境会成为这些致病菌繁衍的优质发展摇篮，这是因为这些原料当中具备了碳源等多种营养成分。并且化妆品基本上都是由水分构成的，潮湿的环境利于致病菌的生长和繁殖。此外化妆品的酸碱度为PH4-7之间，储藏温度20～30℃，这些均与细菌霉菌等致病菌的生长条件接近。以上因素都为致病菌在化妆品中生存和繁衍提供了条件，在劣质化妆品中致病菌超标或保存过程中颜色变化气味霉变将会使使用者不同程度患病感染，因此检测控制化妆品中的微生物极为重要。

2 材料与方法

2.1 样品来源

随机抽样市面上常见的化妆品，水乳护肤类10份、洗发水10份和口红彩妆类各抽取15份，共计65份样品。

2.2 方法

新颁布的《化妆品卫生规范》（2015）规定进行微生物指标安全性评价（见表1）。不得检出耐热大肠菌群/g（或ml）、金黄色葡萄球菌/g（或ml）和铜绿假单胞菌/g（或ml）。

表1 微生物部分安全性指标

3 实验过程

3.1 菌落总数及霉菌和酵母菌数

菌落总数是指1g(或1mL)检样中所含菌落的总数。通过跟化妆品的安全标准进行对比，看样本的各项指标符不符合，如果指标不符合，会对样品造成多大的污染。

按《化妆品卫生规范》（2015）利用标准的检测手段，对六十五份样品的菌落情况进行观察并作出记录，按照霉菌跟酵母菌正常生长状况，在孟加拉红培养基上，放入28℃±2℃培养。所得实验数据见表2。

表2 菌落总数及霉菌和酵母菌数不合格件数

3.2 耐热大肠菌群检验

耐热大肠杆菌系指一群革兰氏阴性无芽孢杆菌，这种菌会对人的肠道造成伤害，在对化妆品进行质检的时候，一定要针对其含量进行试验检测。

制备10g/ml 的样品，加90ml 灭菌生理盐水，从中取10mL稀释液，加到10mL双倍乳糖胆盐的培养基中，置44℃培养箱中培养至48h，不会出现酸性气质，也不会出现气体的时候，就为耐热大肠菌群阴性。即所选取的这几类化妆品均不含耐热大肠杆菌，统计数据见表3。

3.3 金黄葡萄球菌检验

金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，呈葡萄状排列，无芽胞和荚膜。这种菌会让人身体出现问题，严重的时候还会出现败血症的病状，危急人的身体健康。能分解甘露醇，血浆凝固酶阳性。

取10ml稀释的样品接种到90mLSCDLP液体培养基中，置36℃培养箱，培养至24h，上述形态特征疑似菌落接种到甘露醇发酵培养基中，在培养基液面上加入2mm～3mm 的灭菌液体石蜡，置36℃培养箱培养至24h，没有出现产酸现象，则报告无金黄葡萄球菌。所选取的这几类化妆品均不含金黄葡萄球菌，统计数据见表3。

表3 检出三种致病菌的件数

3.4 铜绿假单胞菌检验

铜绿假单胞菌属于假单胞菌属为革兰氏阴性杆菌，氧化酶阳性，能产生绿脓菌素。这种菌类会让人的伤口出现化脓现象，病情加重。

取10ml样品稀释液接种到90mLSCDLP液体培养基中，置36℃培养基18h～24h，无薄膜出现。对可疑菌落氧化酶实验，滴加一滴1%二甲基对苯二胺试液，在15s～30s 之内，不变色，则为氧化酶试验阴性，则报告为铜绿假单胞菌阴性。即所选取的这几类化妆品均不含铜绿假单胞菌，统计数据见表3。

4 分析讨论

按《化妆品卫生规范》（2015）规定方法检测，如果在质量检测的过程当中，化妆品当中的微生物含量只有一种是不符合标准规范的，那么就会影响到化妆品整个的质量。实验得出，眼唇类中，检出1件口红不合格，其余口红和全部睫毛膏符合要求；其他类的化妆品中，检出1件洗发水，2件粉底液不合格，检测的水乳符合要求。检测的化妆品中没有不符合标准含量的霉菌和酵母菌（CFU/g 或CFU/ml）。所以得出结论，控制菌的含量是完全合格的。

本次检验随机抽取的化妆品均为未拆封，市面上常见的化妆品生产厂家均按照规定控制了微生物的含量，生产的均为达标产品。化妆品中均添加了在规定范围内的防腐剂，但要注意购买化妆品后在使用过程中要注意卫生，在限定使用日期内用，减少因过期储藏使病菌繁殖带来二次污染。

通过本实验的研究讨论希望为化妆品微生物检测提供支持和帮助。

5 展望

现如今化妆品行业越来越成为暴利行业，微商和不知名商家经过低成本的加工就可以获取极大的利润。但是因其生产条件不符合标准，微生物含量可能超标，这可能对消费者构成潜在的健康风险，给使用者带去难以想象的伤害。随着打假行动的开展，黑作坊生产的假冒伪劣产品被曝光了出来，不合标准的美容院也都关门倒闭，化妆品的安全质量受到了更多的关注。

由于世界各个国家之间的联系越来越密切，国内的化妆品市场同样也受到国际市场的冲击。在市场出现的化妆品，来自世界各个国家，比如韩国、日本等等，进出口贸易的发展，使得化妆品几经转手，才到消费者的手中，而在转手的过程当中，其微生物的检测实际操作性比较的困难，尽管加大了检测的力度，化妆品的合格率也在不断的提高，不过微生物含量超出标准依旧是当前难以监管的主要内容之一，不凡有贪图便宜的消费者过敏、冒痘出现。将不合格化妆品拦截在上市之前，降低经济损失，微生物指标的检测就显得十分重要。我国化妆品的微生物检测技术还处于发展时期，亟待严格的制度规范。有关监督部门应当对化妆品的微生物检测重视起来，对于制度标准应该设计的更加严格，借助先进的技术手段，对其微生物含量展开严格的检测跟评估，研究出来高效无害的防腐试剂，更好推动化妆品行业的健康、快速高质量的发展。