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基于TaqMan-MGB探针的虾肝肠胞虫荧光定量PCR检测方法

2020-08-04童桂香韦信贤曾德乾熊建华黄光华江林源

西南农业学报 2020年6期
关键词:标准检测

马 来,童桂香,韦信贤,曾德乾,熊建华,王 瑞,黄光华,江林源

(1.北海南方海洋生态养殖有限公司,广西 北海 536000;2.广西水产科学研究院/广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西 南宁 530021;3.南宁市武鸣区陆斡镇水产畜牧兽医站,广西 南宁 530111;4.广西柳州种畜场,广西 柳州 545003)

【研究意义】虾肝肠胞虫(Enterocytozoonhepatopenaei,EHP)隶属于肠胞虫科(Enterocytozoonidae)肠胞虫属(Enterocytozoon),是一种专性细胞内寄生的微孢子虫,在2004年最早发现于泰国养殖的斑节对虾,于2009年首次被分离和正式命名报道,主要感染凡纳滨对虾和斑节对虾等重要养殖虾类,是近年来危害养殖对虾的主要病原之一[1-3]。EHP可通过水平和垂直传播,但主要经口摄食寄生有EHP的鲜活饵料、病虾、死虾或水体中的孢子体而感染[4-5]。EHP感染主要导致养殖对虾生长缓慢甚至停滞,表现为对虾消瘦、大小不均、重量离散[6],且患病对虾肝胰腺遭到破坏,免疫力降低,极易被其他病原侵染而死亡,给对虾养殖业带来严重经济损失[7]。目前,EHP已对全球对虾产业构成严重威胁,在印度、委内瑞拉、中国、泰国、越南、马来西亚及文莱等国家均有报道[8-12]。EHP的危害与其感染数量密切相关,轻度感染基本上不影响对虾的生长发育,中度感染影响对虾的营养吸收,严重感染损坏对虾免疫系统[13]。因此,建立一种快速且准确的EHP定量检测方法,在虾苗检疫、亲虾筛选及成虾养殖疫情监测过程中根据其定量数据及对虾养殖模式制定相应措施,对有效防控由EHP引起的虾病害具有重要意义。【前人研究进展】EHP感染前期无明显病症,需采用组织学方法或分子生物学方法等实验室手段检测才能确诊。……

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