段晋伟 ， 白燕雨 ， 刘家祺 ， 高晓莎 ， 张慧琴 ， 韩郭皓 ， 霍乃蕊 ， 古少鹏

(山西农业大学动物科技学院 ， 山西 太谷 030801)

金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus，S.aureus)是威胁人和动物健康的主要病原菌之一，可通过多种媒介进行传播，极易感染，致病性极强，也是引起奶牛等反刍动物乳腺炎的主要病原[1-2]。随着养殖业趋于规模化发展和抗菌药物的过度使用，使牛场中S.aureus的耐药菌数不断增加，尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的大量出现，给奶牛疾病的防治带来极大困难[3]。研究表明，S.aureus可形成微生物气溶胶广泛散布于奶牛养殖场内外环境中，进而污染鲜乳及乳制品[4-5]；蒋奇君等[6]研究显示，牛乳和环境中S.aureus的耐药性严重；王登峰等[7]测定结果显示，牛乳中MRSA分离率较高且多重耐药性较严重，且牛乳中MRSA的一部分源于环境，很难从牛群中根除。有关MRSA的报道很多，但在鲜乳生产各环节的分布、耐药情况和它们的亲缘关系尚未见报道。本试验从山西部分奶牛养殖场的内外环境、挤奶间环境及乳等各个生产环节中分离鉴定S.aureus，与MRSA及耐药性分析，通过mecA基因的高通量测序和ERIC-PCR分析技术，研究鲜牛乳生产中MRSA的亲缘关系，以期为预防和控制MRSA的散播和该菌引起的食源性疾病提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 奶牛场基本情况 采集地为山西晋中某奶牛养殖合作社，其中有8个奶牛场，每场约100头奶牛，共用1个挤奶间。

1.2 质控菌株 金黄色葡萄球菌(ATCC25923)，购自南京便诊公司；白色葡萄球菌(26101-19)，山西省职工医学院惠赠；耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(ATCC43300)，购自上海沪峥生物科技公司。……