曾祥久

(丹东坤霖林业服务有限公司，辽宁 丹东 118200)

银杏Ginkgobiloba是银杏科唯一的植物，我国独一无二的经济林树种。因其用途多样，在造林、制药和保健中具有举足轻重的经济价值和研究价值[1-2]。在银杏常规杂交育种实践中，花粉作为遗传信息的载体传递给母本来选育优质杂交后代[3]。父本自身花粉活力的大小对育种工作有着直接的影响[4]。因此，研究其花粉萌发特性对育种工作具有积极意义。虽然前人对银杏花粉的离体萌发开展了一些研究，但是其所使用的培养基配方比较复杂，花粉萌发的培养时间也比较长。因此，寻找一种适宜而简单的培养基用于银杏花粉离体萌发是非常必要的。本研究旨在通过蔗糖、硼和钙离子这3种重要的营养成分对银杏花粉萌发的影响，优化花粉萌发培养基成分，为后续杂交育种中花粉生活力测定提供一套简单易行的方法。

1 材料与方法

1.1 材 料

试材为银杏花粉。2017年4月21日在丹东市采集带有花序的枝条，放在有冰袋的保温盒内带回实验室。取下花药于阴凉干燥处放置1 d后采集花粉。用500目细筛筛选花粉，放置于1.5 mL离心管内，-20 ℃保存备用。

1.2 方 法

基本培养基含0.7%琼脂、0.1%硝酸钾、0.2%硫酸镁。添加蔗糖、硼酸和氯化钙后，培养基于121 ℃高压蒸汽灭菌15 min，在直径60 mm培养皿内倒一薄层培养基。将花粉均匀撒播在冷却的培养基上，放在25 ℃恒温恒湿箱5 d。在显微镜下随机选取5个花粉数大于30的视野，统计萌发率，重复3次。

1.2.1 单因子试验

在基本培养基中加入蔗糖，质量浓度分别为0、50、100、150、200 g·L-1；……