周菁， 郭丽

(1. 陕西省肿瘤医院肿瘤科， 陕西 西安 710061； 2. 空军第九八六医院干部病房科， 陕西 西安 710054)

小细胞肺癌(small cell lung carcinomas, SCLC)是肺癌的一个亚型，约占肺癌的15%，但其5年生存率仅有1%～2%，明显低于其他类型的肺癌[1]。因此，探讨SCLC转移的分子机制对于预防其复发至关重要。近年来，众多学者对SCLC的病理机制进行了深入探究，并开发了多种治疗SCLC的靶向药物，主要针对Notch信号通路、酪氨酸激酶受体、免疫检查点、凋亡信号通路等相关的靶点[2]。

Notch信号通路激活后可以抑制SCLC癌细胞的增殖与转移。DLL3作为Notch家族的一员，可以抑制Notch信号通路的激活[3]。研究表明，DLL3在SCLC细胞表面呈高度上调，一项临床报道发现83%的SCLC肿瘤患者DLL3呈阳性，其中32%高表达，这表明DLL3可能是治疗该疾病的潜在靶点[4]。目前关于DLL3在SCLC发生、发展中的作用机制研究并不多，最近有报道称DLL3通过调控上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关蛋白Snail促进癌细胞的迁移和侵袭[5]。本研究通过收集SCLC患者的临床信息，分析DLL3在癌组织与癌旁组织中的表达，并探讨DLL3促进SCLC转移的分子机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 组织来源 收集陕西省肿瘤医院2017年1月至2018年12月手术切除的SCLC组织及其癌旁组织50例，所有病例经病理学确诊。本研究经由陕西省肿瘤医院伦理委员会批准。

1.1.2 试剂 RPMI-1640培养基、胎牛血清、青霉素和链霉素(美国Gibco公司)；SCLC细胞系H592、正常支气管上皮细胞HBE(广州吉妮欧生物科技有限公司)；DLL3，MUC-1, Snail, GAPDH抗体(英国Abcam公司)；Transwell小室(美国Corning公司)；CCK-8试剂盒(北京索莱宝科技有限公司)；凋亡检测Annexin V FITC-PI试剂盒(北京欣博盛生物科技有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养 H592和HBE均培养于含有10%胎牛血清的RPMI-1640培养基，并加入终浓度为1%的青霉素和链霉素，置于37 ℃、5% CO2的培养箱中培养。……