赵佳伟， 施敏， 郑金旭

(1. 江苏大学医学院， 江苏 镇江 212013； 2. 上海交通大学医学院附属同仁医院消化内科， 上海 213300； 3. 江苏大学附属医院呼吸内科， 江苏 镇江 212001)

急性肝损伤是一种严重影响人生命健康甚至危及生命的疾病，其发病多与氧化应激的发生相关，在氧化应激发生时，肝脏内活性氧水平大幅度上升[1]。活性氧能够通过脂质过氧化、蛋白质变性方式造成细胞的损伤和变性[2]，研究表明间充质干细胞外泌体能够修复受损组织[3-4]。本研究旨在考察间充质干细胞外泌体对D-氨基半乳糖(D-galactosamine hydrochloride, D-GalN)/脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)诱导的急性肝损伤模型小鼠的治疗效果。从细胞和动物水平考察外泌体减轻氧化应激、保护肝脏的效果，为急性肝损伤的治疗提供新的思路。

1 材料与方法

1.1 试剂和仪器

DMEM、RMPI 1640培养基、α-MEM、胎牛血清、青霉素/链霉素双抗溶液(美国Gibco公司)，胰酶(北京兰博利德公司)，醋酸双氧铀(北京中镜科仪技术有限公司)，L02人肝细胞系(上海中科院细胞库)，CD9兔抗小鼠单克隆抗体、CD63小鼠抗小鼠单克隆抗体、山羊抗兔二抗、山羊抗小鼠二抗(英国Abcam公司)，BCA蛋白定量试剂盒(美国Thermo Scientific公司)，小鼠成骨诱导分化培养试剂盒(赛业生物有限公司)，丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase，ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase，AST)测定试剂盒(日本Toshiba公司)，电泳仪(美国Bio-Rad公司)，多色荧光凝胶成像仪(以色列DNR公司)，CCK-8试剂盒、二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(2′,7′-dichlorofluorescin diacetate, DCFH-DA)活性氧荧光探针、D-GalN、LPS、超氧化物歧化酶活性检测试剂盒、丙二醛含量检测试剂盒、过氧化氢酶活性检测试剂盒(北京索莱宝科技有限公……