周新茹， 金倩， 张蕾蕾， 吴佩佩， 傅强， 钱晖

(1. 江苏大学医学院， 江苏 镇江 212013； 2. 上海交通大学附属第一人民医院脊柱外科， 上海 200080)

小胶质细胞是中枢神经系统的天然免疫细胞，与多种神经退行性疾病和脑炎性疾病的发病机制有关。它起源于胚胎卵黄囊原始髓系祖细胞[1-2]，占脑部组织细胞5%～15%[3]。小胶质细胞通过其独具特点的“分枝”状结构，行使清除损坏组织、阻止毒性和死亡扩展的免疫学作用。此外，小胶质细胞可通过调控轴突生长、髓鞘形成和突触重塑来促进神经连接，从而调节神经发生、神经胶质形成和神经元迁移[4-6]。研究表明M1极化态小胶质细胞可加剧组织损伤，M2极化态有助于减少炎症并促进组织修复[7]。中风、阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)和帕金森病(Parkinson’s disease，PD)等神经退行性疾病可致M1小胶质细胞过度极化，加重组织损伤。

本课题组前期研究表明，人脐带间充质干细胞外泌体(human umbilical cord mesenchymal stem cells exosomes，hucMSC-Ex)可通过降低炎症反应缓解肠炎、减少皮肤烫伤程度和肾损伤等[8-11]。在此基础上，本研究旨在探讨hucMSC-Ex能否通过促进小胶质细胞向M2极化以减少炎症反应，为治疗炎症性相关神经系统疾病提供可靠的治疗方案。

1 材料与方法

1.1 主要材料和仪器

大鼠小胶质细胞购自上海钰博生物科技有限公司；脂多糖(lipopolysaccharides，LPS，日本Sigma公司)，兔抗人CD9单克隆抗体(美国CST公司)，兔抗人CD63/CD81多克隆抗体(美国Proteintech公司)，兔抗大鼠Iba1多克隆抗体(英国Abcam公司)，小鼠抗大鼠iNOS/Arg1单克隆抗体(美国Santa Cruz Biotechnolog公司)，兔抗大鼠p-NF-κB p65/NF-κB(美国CST公司)，兔抗大鼠β-肌动蛋白(美国Bioworld公司)，HRP标记抗兔/鼠IgG二抗(美国Invitrogen公司)，BCA蛋白定量试剂盒(康为世纪公司)，ELISA试剂盒(中国Excell Bio公司)，外泌体提取试剂盒(美国SBI公司)；……