王 虎

（辽宁省农业发展服务中心，沈阳 110032）

黄曲霉毒素B1（AFB1）是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物，含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮（香豆素）。AFB1是已知的化学物质中致癌性最强的一种。AFB1对包括人和若干动物具有强烈的毒性，其毒性作用主要是对肝脏的损害[1-4]。目前，可用液相色谱法检测黄曲霉毒素B1，但需要大型的仪器设备，价格昂贵，操过过程复杂、时间长，且无法在现场和基础小型实验室使用[5-7]。也有采用黄曲霉毒素B1酶联免疫试剂盒用于大量样品的筛查，检测快速，但操作复杂[8-9]。因此，急需一种既简单快速，又能准确定量的检测方法，荧光定量免疫层析技术正好可以满足需求[10]。本试验拟建立一种饲料中黄曲霉毒素B1荧光定量检测方法。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 仪器

荧光免疫分析仪（苏州和迈精密仪器有限公司），XH-C 涡旋混合器（新宝仪器有限公司），称量天平（DIGITAL SCALE）。

1.1.2 主要试剂和耗材

黄曲霉毒素B1单克隆抗体和黄曲霉毒素B1半抗原-牛血清白蛋白偶联物，购自武汉优博生物技术有限公司；MES，购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司；EDC，购自国药集团；试剂牛血清白蛋白，购自上海生工生物工程有限公司；时间分辨荧光微球，购自上海辉质生物科技有限公司；黄曲霉毒素B1及其他真菌毒素的标准品，购自Sigma公司；硝酸纤维素膜，购自MDI。

1.2 溶液的配制

0.1 M 磷酸氢二钠：Na2HPO4·12H2O 35.85 g·L-1，纯化水溶解。微球洗涤液：MES 1.95 g·L-1，纯化水溶解，1 mol·L-1NaOH 调节pH 至6.0。微球活化剂：EDC 76.68 g·L-1，纯化水溶解，置于4 ℃保存。0.05 mol·L-1BB 9.0：十水合硼砂3.814 g·L-1，硼酸0.619 g·L-1，纯化水定容至1 L 即可。……