张 蕊，孙玲凌，王彦伟

(周口职业技术学院 农牧工程学院，河南 周口 466000)

楸树是周口市乡土树种之一，在当地城乡绿化中应用越来越广泛。近年来，组织培养繁育优良苗木的技术得到了广泛应用，在植物组培过程中，组培苗及培养基褐化现象比较常见，严重影响了组培苗的生长和分化，甚至造成组培苗的死亡。活性炭具有较强的吸附性，周艳等[1]研究表明，在培养基中添加1.5 g/L活性炭可降低高山杜鹃褐变率；李萍等[2]研究表明，牡丹继代转接时，在添加2.0 g/L活性炭的培养基中培养4 d后转入不含活性炭的培养基中，能有效控制褐化和避免活性炭对生长和增殖的负面影响。在楸树组织培养快速育苗技术中，通过在培养基中添加不同浓度的活性炭，分析活性炭对楸树无菌苗褐化的影响，从而为制定合理的组培技术条件提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

楸树增殖培养基采用MS +NAA 0.15 mg/L+6-BA 0.8 mg/L；选取经过25 d增殖培养、高度约5 cm的无菌苗为试验材料；活性炭为分析纯。

1.2 试验设计

活性炭在培养基中添加浓度设为250 mg/L、500 mg/L、750 mg/L、1 000 mg/L，同时设不添加活性炭的培养基为对照。将无菌楸树培养苗接种到含有不同浓度活性炭的增殖培养基中，在光照12 h/d、光照强度为2 000～2 500 lx，温度为25～28℃的条件下增殖培养20 d。

1.3 测定项目

在培养基中增殖培养20 d后统计褐化率和增殖系数。

2 结果与分析

2.1 不同浓度活性炭培养基处理无菌苗的褐化率

由表1可见，在培养基中随着活性炭浓度的增加，楸树无菌苗褐化率呈下降趋势。与对照相比，当在培养基中添加250 mg/L、500 mg/L、750 mg/L和1 000 mg/L的活性炭，褐化率分别下降7.50百分点、11.66百分点、16.66百分点和25.83百分点，当浓度为500 mg/L、750 mg/L和1 000 mg/L时，无菌苗的褐化率下降与对照相比，差异达显著水平。

2.2 不同浓度活性炭培养基处理无菌苗的增殖系数

由表1还可见，当培养基中活性炭的浓度为250 mg/L、500 mg/L和750 mg/L时，与对照相比，楸树无菌苗的增殖系数分别增加26.47%、29.41%和18.63%，且当培养基中活性炭的浓度为250 mg/L和500 mg/L时，与对照的差异达到显著水平。当培养基中活性炭的浓度为1 000 mg/L时，与对照相比，楸树无菌苗增殖系数下降5.39%。

表1 不同浓度活性炭培养基处理无菌苗的褐化率及增殖系数

3 结论与讨论

试验结果表明，当浓度为500 mg/L时，楸树无菌苗的褐化率下降11.66百分点，且无菌苗的增殖系数为2.64，与对照相比差异达显著水平，为试验较为适宜的浓度。

在植物组织培养中，特别是木本植物的外植体易产生褐化现象，原因是植物体内含有大量的多酚类化合物，同时培养基中过高的酚类物质和无机盐会加剧褐化，强光和高温亦会导致褐化现象严重。为了防止外植体的褐化，在试验时尽量选取酚类化合物含量较低的材料和部位，选择无机盐含量较低、不加肌醇的培养基，并在较弱的光线或黑暗中进行培养。

活性炭可以吸附对生长有抑制作用的褐色醌类物质，可有效抑制褐变，防止有害物质积累，对防止培养基褐变有良好的效果。在楸树组织培养中，通过在诱导培养基中添加不同浓度的活性炭表明，随着添加的活性炭浓度增加，无菌苗的褐化率呈下降趋势；当活性炭达到一定浓度时，虽然褐化率下降，但增殖系数亦呈下降趋势，这可能与活性炭在吸附醌类物质的同时吸附培养基中激素类物质有关[3]。韩文璞等[4]研究表明，一定浓度的活性炭对甜樱桃试管苗的增殖起到促进作用；而当活性炭浓度过高，反而抑制试管苗的生长，因此在植物组织培养中活性炭的浓度较关键。但活性炭对于培养基中物质的吸附原理和植物体内物质代谢的影响有待进一步研究。