牛病毒性腹泻病毒衣壳蛋白原核表达及多克隆抗体的制备
2020-07-13张忠辉高闪电独军政田占成王建东殷宏
张忠辉,高闪电*,独军政,田占成,王建东,殷宏,3*
(1. 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃 兰州 730046;2. 宁夏农林科学院动物科学研究所,宁夏 银川 750002;3. 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏 扬州 225009)
牛病毒性腹泻(bovine viral diarrhea,BVD)是由牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)感染导致的动物疫病,呈世界性分布[1]。该病主要发生于牛,可出现高热、腹泻、白细胞减少、沉郁、流涎、减奶、停奶、结膜炎、口腔黏膜充血溃疡、怀孕母牛流产、产死胎或畸形胎等多种临床症状,还可由于持续感染导致免疫耐受和免疫抑制。鉴于该病导致的严重经济损失,世界动物卫生组织将其列为法定报告的牛传染性疾病之一,我国农业农村部也将其列为三类动物疫病。
BVDV在分类学上属于黄病毒科(Flaviviridae)、瘟病毒属(Pestivirus),为单股正链RNA病毒[2]。成熟的病毒粒子为球形,直径40~60 nm,其核衣壳位于病毒粒子的中央,呈二十面体对称结构,由脂质双层包裹C蛋白和病毒基因组RNA构成。BVDV基因组全长12.3~12.5 kb,只有一个开放阅读框,编码一个由约4 000个氨基酸组成的多聚蛋白,在翻译同时或翻译后经细胞和病毒基因编码的蛋白酶加工为11或12种蛋白,其中P14(C)、gP48(Erns)、gP25(E1)、gP53(E2)4个蛋白为病毒的结构蛋白,其余为病毒的非结构蛋白[3]。C蛋白是病毒编码的第二个蛋白,分子质量为14 kDa,是一种小的碱性多肽,主要功能是结合病毒基因组RNA并形成核衣壳,在保护病毒基因组RNA方面起重要作用。研究表明,同属的猪瘟病毒C蛋白还具有参与细胞转录调节[4]、影响病毒毒力[5-6]、拮抗病毒增殖等作用[7]。……
